אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 4:13 דק׳ • July 8th, 2025
קחו למשל רקמת גליובלסטומה אנושית, גידול מוח ראשוני שמקורו בתאי גליה.
שטפו את הטישו באמצעות מדיום עיבוד קר כקרח כדי להסיר שאריות דם.
חותכים את הרקמה לחתיכות ומכניסים אותה לתבנית הטבעה המכילה אגרוז מותך.
מצננים את התבנית, ומאפשרים לאגרוז להתפלמר וליצור מטריצת ג'ל יציבה.
הסר את גוש הרקמה מהתבנית וקבע אותו על צלחת הדגימה של ויברטום.
הוסף את אמצעי העיבוד הקר כקרח כדי להטביע את הבלוק. העבירו תערובת גז מחומצן כדי לאוורר את המדיום, תוך שמירה על כדאיות הרקמות.
חתכו את רקמת הגידול המוטמעת לפרוסות דקות.
העבירו פרוסה לצלחת פטרי המכילה את מדיום העיבוד הקר כקרח כדי לשמר את ארכיטקטורת הרקמות.
לאחר מכן, צלחו את פרוסת הרקמה על תוספת קרום חדירה בבאר המכילה מדיום תחזוקת תרבית פרוסות.
שמור על הפרוסה בתנאים פיזיולוגיים. תרבית הפרוסות מוכנה לבדיקות במורד הזרם.
התחל בשימוש במלקחיים סטריליים כדי להניח תוספות תרבית PTFE ריקות לכל באר של צלחת בת שש בארות המכילה 1 מיליליטר של מדיום תחזוקת תרבית פרוסות לכל באר. לאחר הוספת כל התוספות, הנח את הצלחת באינקובטור תרבית רקמות לח במעטפת מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס ו-5% CO2.
לאחר מכן, הניחו את חתיכות רקמת הגידול בצלחת פטרי המכילה מדיום עיבוד קר כקרח, והשתמשו בפיפטה כדי לשטוף בעדינות את הרקמה שלוש פעמים עם מדיום טרי כדי להסיר את כל תאי הדם האדומים שנדבקו. לאחר השט
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים