אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 4:02 דק׳ • July 8th, 2025
התחל עם גליומספרות, אגרגטים של תאים שמקורם בגידול מוח או גליובלסטומה.
הוסף אנזימי דיסוציאציה. דגירה כדי להפריד את תאי הגליובלסטומה ולקבל תרחיף חד-תאי.
לאחר מכן, הכניסו מדיום תרבית מועשר בסרום כדי לעצור את פעילות האנזים.
צנטריפוגה והסר את הסופרנטנט, ואז השהה מחדש את התאים.
מסננים את המתלה, ואז צנטריפוגה ומסירים את הסופרנטנט.
השעו מחדש את התאים במבשרי הידרוג'ל המכילים פפטידים קטנים.
העמיסו את התערובת הזו לבארות עם תבנית סיליקון שהורכבה מראש המכילה חומצה היאלורונית.
מערבבים את התמיסה. דגירה כדי לאפשר את האינטראקציה בין החומצה ההיאלורונית לקודמני ההידרוג'ל, ויוצרים הידרוג'ל המקל על לכידת התאים.
שכבו את ההידרוג'ל במצע תרבית כדי לשמור על הישרדות התאים.
לאחר פירוק התבנית, דגרו את ההידרוג'ל.
בתוך ההידרוג'ל, חלבוני ההדבקה על התאים מקיימים אינטראקציה עם פפטידים קודמים וחומצה היאלורונית.
זה גורם לתאים ליצור אשכולות קטנים ולפתח תרבית תלת מימדית.
כדי להתחיל, הניחו תבניות גומי סיליקון נקיות ויבשות בכל באר של צלחת 12 בארות שאינה מטופלת בתרבית רקמות, והשתמשו בקצה הנקי והקהה של קצה פיפטה כדי להדביק את התבניות לתחתית הצלחת. לאחר בדיקת האיטום בין התבניות לתחתית הבאר, אסוף את כדורי הגליומה המנותקים מתרבית תאי גליובלסטומה על ידי צנטריפוגה, והשהה מחדש את הגלולה במיליליטר אחד של אנזים דיסוציאציה של תאים.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים