אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 5:12 דק׳ • July 8th, 2025
התחל עם מוח של גור עכברים.
בודד את המוח הקטן וקבל פרוסות רקמה בעובי מתאים.
מעבירים את הפרוסות על תוספות ממברנה המונחות בתוך בארות צלחת תרבות המכילות מדיה.
בבארות מטופלות, המדיה מכילה תרכובת בדיקה נוירו-פרוטקטיבית. בארות בקרה חסרות את המתחם. דגירה.
בתנאי בקרה, תאי פורקינג'ה המוח הקטן עוברים אפופטוזיס, המחקה התפתחות מוקדמת לאחר הלידה in vivo.
בבארות מטופלות, בהתאם לפוטנציאל שלה, התרכובת עשויה להגן על התאים מפני אפופטוזיס.
שוטפים את הפרוסות ומתקנים אותן כדי לשמור על שלמות התאים.
העבירו את הפרוסות לתמיסה חוסמת חדירות כדי לחלחל את קרומי התאים ולחסום אתרי קשירה לא ספציפיים.
שכבת נוגדנים ראשוניים המכוונים לחלבון קושר סידן המתבטא במיוחד בתאי פורקינג'ה.
שטפו והכניסו נוגדנים משניים מצומדים פלואורופור המכוונים לנוגדנים הראשוניים.
צבעו את הגרעינים בצבע קושר DNA והרכיבו את הפרוסות.
באמצעות מיקרוסקופ קונפוקלי, כמת את תאי פורקינג'ה ברי קיימא כדי לזהות את הפוטנציאל הנוירו-פרוטקטיבי של תרכובת הבדיקה
כדי לקצור את המוח הקטן, השתמש במלקחיים ישרים כדי לתפוס את ראש הגור באף, והשתמש במספריים לעיניים ישרות כדי לחתוך את הקרקפת מהקצה האחורי לרוחב לקו האמצע. חתכו את הגולגולת באותו אופן, כוונו את קצות המספריים החוצה כדי למנוע נזק למוח הקטן, והשתמשו במרית כדי להעביר את המוח לצלחת של 60 מילימטר המכילה HBSS קר ו
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים