Name: גזע להשתלות אסטרטגיות Cell לשיקום של ליקוי קוגניטיבי נגרמת על ידי הקרנות גולגולתי (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-10-18T12:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 24 s
Description: למדו שיטה לשתלת תאי גזע עצביים אנושיים בהיפוקמפוס של עכברושים לאחר הקרנת גולגולת. שיטה זו מאפשרת לחקור שיקום תפקוד קוגניטיבי ונדידת תאים לאחר טיפול בקרינה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי NIH NINDS מענק R01 NS074388 581 (CL Limoli), קליפורניה המכון לרפואה הרגנרציה (CIRM) גרנט RS1-00413 (CLL), CIRM הדרכה גרנט TG2-0115 (MMA), ואת גרנט CIRM לאלים תמיכה תיעוד וידאו.

<ol><li>Acharya, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Consequences+of+ionizing+radiation-induced+damage+in+human+neural+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Free.+Radic.+Biol.+Med%22%5BJournal%5D)">Consequences of ionizing radiation-induced damage in human neural stem cells.</a> Free. Radic. Biol. Med. , (2010).</li>
<li>Acharya, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rescue+of+radiation-induced+cognitive+impairment+through+cranial+transplantation+of+human+embryonic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.+S.+A%22%5BJournal%5D)">Rescue of radiation-induced cognitive impairment through cranial transplantation of human embryonic stem cells.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 106, 19150-19155 (2009).</li>
<li>Khan, F. M. Ch. 11. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBoyer%2C+A+%22Treatment+planning+in+Radiation+Oncology%22">Treatment planning in Radiation Oncology</a>. , Lippincott Williams & Wilkins. (2007).</li>
<li>Lawson, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracranial+application+of+IMRT+based+radiosurgery+to+treat+multiple+or+large+irregular+lesions+and+verification+of+infra-red+frameless+localization+system%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurooncol%22%5BJournal%5D)">Intracranial application of IMRT based radiosurgery to treat multiple or large irregular lesions and verification of infra-red frameless localization system.</a> J. Neurooncol. 97, 59-66 (2010).</li>
<li>Ling, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Commissioning+and+quality+assurance+of+RapidArc+radiotherapy+delivery+system%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Radiat.+Oncol.+Biol.+Phys%22%5BJournal%5D)">Commissioning and quality assurance of RapidArc radiotherapy delivery system.</a> Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 72, 575-581 (2008).</li>
<li>Otto, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Volumetric+modulated+arc+therapy%3A+IMRT+in+a+single+gantry+arc%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Phys%22%5BJournal%5D)">Volumetric modulated arc therapy: IMRT in a single gantry arc.</a> Med. Phys. 35, 310-317 (2008).</li>
<li>Paxinos, G. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPaxinos%2C+G+%22The+Rat+Brain+in+stereotaxic+coordinates%22">The Rat Brain in stereotaxic coordinates</a>. , 6th edn, Elsevier. (2007).</li>
<li>Hess, D. C., Borlongan, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell-based+therapy+in+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Expert.+Rev.+Neurother%22%5BJournal%5D)">Cell-based therapy in ischemic stroke.</a> Expert. Rev. Neurother. 8, 1193-1201 (2008).</li>
<li>Hefferan, M. P., Johe, K., Feldman, E. L., Lunn, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+immunosuppressive+therapy+for+spinal+grafting+of+human+spinal+stem+cells+in+a+rat+model+of+ALS%5BTitle%5D)+AND+%22Cell.+Transplant%22%5BJournal%5D)">Optimization of immunosuppressive therapy for spinal grafting of human spinal stem cells in a rat model of ALS.</a> Cell. Transplant. , (2011).</li>
</ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

מחקר ניכרת מתנהלת חקירת עצום של דרכים שתאי גזע יכולים לשמש קלינית לשחזר פונקציות נורמלי רקמות שנפגעו, בני וחולים 8. מימוש בסופו של דבר המאמצים האלה תדרוש הבנה מפורטת של התנהגות של תאים בתוך engrafted microenvironments ייחודי נבדלים הרקמות הבריאות ללא פגע. העבודה שלנו הוכיחה כי בתוך המיטה רקמות מוקרן, NSCs engrafted cranially יכולה לשחזר מבחינה תפקודית קוגניציה, שם הם לשרוד, להעביר להבדיל לאורך שושלות עצביים גליה 2. בדיוק כיצד תאים אלה לתווך התאוששות של ההכרה אינו ברור כרגע, אבל תלוי ביצוע סידרת ניסויים מבוקרים היטב נהלים באופן לשחזור. יש לנו נהלים אלה מפורטים קריטי כאן מאמצים לזרז את הפוטנציאל translational של טיפולים בתאי גזע עבור לטיוב תופעות לוואי קוגניטיביות הקשורותניהול קליני של המוח וצורות אחרות של סרטן. שיקולים נוספים שעשויים להשפיע באופן משמעותי על איכות הנתונים מודגשים להלן. טיפולים והשתלות מבוסס תלוי בתאי גזע כמו מגיב קריטי, ובהתאם לכך, יש לדאוג למימוש שצריך לאפיין תרבויות, לשמור על עקרות להשתמש במספרים מעבר מתאימים על האמינות של תוצאות. המושתלים בתאי גזע אנושיים תויגו עם BrdU לפני הניתוח, על מנת לספק אמצעי אחד למעקב אותם in vivo. תחת תנאי הניסוי שלנו, NSCs המושתלים לא עברו התפשטות נרחבת, כך דילול של התווית BrdU לא היה בעייתי. לחלופין, המושתלים בתאי גזע אנושיים ניתן להבחין בין התאים על ידי המארח immunostaining עבור סמנים ספציפיים אדם כגון חלבון מטריקס גרעיני (h-NUC או hNUMA) 9 או אדם ספציפי לערמונית גרעיני (HuNu) 2. בתאי גזע האדם יכול גם להיות מתויג עםמגוון רחב של סמנים ניאון כדי להקל על הזיהוי שלהם בתוך המוח המארח. שימו לב לפרמטרים הקרנה להגדיר מדויק משלוח טכניקות מנה, לבין אלה שתוארו כאן המודל הנוכחי פרקטיקות קליני לאונקולוגיה. השתלת לשעתקו בתאי גזע במוח הוא גם קריטי, מושגת באמצעות מכשיר stereotaxic דיגיטלית. היכולת בדיוק micromanipulate מזרק מיקרו להשתלה בתאי גזע המוח במבנים קטנים כמו ההיפוקמפוס מקטינה באופן משמעותי טעויות אנוש. באמצעות מנגנון זה, NSCs הושתלו בארבעה אתרים שונים פורש הקדמי אזורים של ההיפוקמפוס האחורי חולדה. Dorso-הגחון (DV) קואורדינטות נקבעו על סמך ניסיון עם athymic בעירום (ATN) חולדות כזה ניתוחים לא יגרום נזק להיווצרות 2 בהיפוקמפוס. קטע העטרה דרך המוח עכברוש מגלה מבנים מפתח כולל היווצרות בהיפוקמפוסuding gyrus משוננת (DG), את hilus משוננת (DH) ו CA1 ו CA3 תת תחומים (איור 8). NSCs המושתלים, הציג dorsally מתוך מערכת מחט לעין (NT, Redline), הם דמיינו כמו כתמים כהים (חום) תאים שהופקדו באתר ההשתלה שחרור (Tr) ממש מתחת כפיס המוח (CC), כי לאחר מכן נודדים ברחבי septo ציר ה-הזמני של ההיפוקמפוס.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> חומר שם </td><td> סוג </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגי </td><td> הערה </td></tr><tr><td> Instrument Digital Stereotaxic w/45 ° ו 18 ° Earbars </td><td> הגולגולת השתלה כירורגית ההתקנה </td><td> Leica Microsystems (בעבר: MyNeuroLab) </td><td> 39463501 </td><td> אביזרים שימושיים: שלב החימום עם מקור זרם משתנה (כדי לשמור על טמפרטורת הגוף במהלך ניתוח) </td></tr></tbody></table>

גזע להשתלות אסטרטגיות cell לשיקום של ליקוי קוגניטיבי נגרמת על ידי הקרנות גולגולתי

Stem Cell Transplantation Strategies for the Restoration of Cognitive Dysfunction Caused by Cranial Radiotherapy

רדיותרפיה לעתים קרובות מספק את המפלט היחיד קליניים אלה לקתה גידולים במוח ראשוני או גרורתי. אמנם מועיל, הקרנה הגולגולת יכול לגרום לירידה הדרגתית מתישה בהכרה שעשויים, בין השאר, להיגרם על ידי דלדול של בתאי גזע עצביים. בהתחשב הישרדות מוגברת של חולים שאובחנו עם סרטן המוח, איכות החיים במונחים של בריאות קוגניטיבית הפכה הדאגה הגוברת, במיוחד בהיעדר לטווח ארוך טיפולים משביע רצון. כדי לענות על חשש זה בריאותיות חמורות השתמשנו תא גזע החלפת כאסטרטגיה להילחם קרינה הנגרמת ירידה קוגניטיבית. המודל שלנו מנצל חולדות בעירום athymic נתון הקרנה גולגולתי. קרינה מייננת היא מועברת כמו המוח או כולו או כמו קרן ממוקדת מאוד בהיפוקמפוס באמצעות לין אוזן radiosurgery (linac) ccelerator stereotaxic מבוסס. יומיים לאחר הקרנה, huאדם בתאי גזע עצביים (hNSCs) הושתלו stereotaxically אל ההיפוקמפוס. העכברים הוערכו אז לשינויים, קוגניציה הישרדות התא מורכבים ועל הביטוי של התמיינות ספציפית סמנים 1 ו - 4 חודשים לאחר ההקרנה. פרדיגמות קוגניטיביות שלנו בדיקות הראו כי חיות engrafted עם hNSCs התערוכה שיפור משמעותי בתפקוד הקוגניטיבי. Stereology משוחדת מגלה הישרדות משמעותי (10-40%) של תאים engrafted ב 1 ו - 4 חודשים לאחר ההשתלה, תלוי בכמות וסוג של תאים מורכבים. תאים נודדים Engrafted בהרחבה, להבדיל לאורך שושלות גליה ו העצבית, ולבטא מגוון רחב של סמנים פנוטיפי בשלה ובוגרת. הנתונים שלנו מראים יתרונות קוגניטיביים ישיר engrafted שמקורם בתאי גזע אנושיים, טוען כי הליך זה עלול יום אחד להרשות לעצמו אסטרטגיה מבטיח לשיקום לטווח ארוך הפונקציונלית של קוגניציה אצל אנשים חשופים radiot גולגולתיherapy. כדי לקדם את הפצת הנהלים קריטי צורך לשכפל ולהרחיב את הלימודים שלנו, אנו מספקים תיעוד בכתב חזותיים של צעדים מרכזיים בתוכנית ניסיונית שלנו, עם דגש על stereotaxic radiosurgey והשתלות.

הגידול בחולים המוח שגרתי לעבור הקרנות גולגולתי, ואף מועיל, טיפול זה לעתים קרובות תוצאות תפקוד קוגניטיבי מתישה. זו הבעיה הבלתי פתורה רציני כרגע, לא נותר קליני, העלתה את המאמצים שלנו כדי לתכנן תא גזע טיפולים מבוססי להתאוששות של קרינה הנגרמת decrements קוגניטיבי.

גזע להשתלות אסטרטגיות Cell לשיקום של ליקוי קוגניטיבי נגרמת על ידי הקרנות גולגולתי

רדיותרפיה מספקת לעיתים קרובות את המענה הקליני היחיד עבור אלו הסובלים מגידולי מוח ראשוניים או גרורתיים. למרות תועלתה, הקרנה קרניאלית...

המטרה הכללית של הניסוי הבא היא להשתיל תאי גזע באופן הדיר בתוך ההיפוקמפוס. ראשית, חולדות אתאימיות (athymic) עוברות הקרנה סטריאוטקטית, המדמה את מה שעשוי להתרחש במהלך טיפול קליני בסרטן המוח. במעבדה, גודלים תאי גזע עצביים אנושיים לצורך השתלה; בדרך כלל נדרשים 1 מיליון תאים לטיפול בחולדה אחת.יומיים לאחר ההקרנה, מוזרקות תאי הגזע באיטיות אל ההיפוקמפוס במיקום מדויק. בסופו של דבר, הפרוטוקול מראה את נדידתו של תאי הגזע המושתלים ברחבי ההיפוקמפוס. הרעיון למתודולוגיות אלו עלה בראשיתית כאשר התחלתי לשקול את הסיכויים לשימוש בתאי גזע כדי להפוך את העיכוב של הנוירוגנזה לאחר הקרנה גולגולתית. באופן כללי, אנשים המכירים שיטה זו יתקשרו, מאחר שגידול תאי גזע אינו פשוט ומצריך תשומת לב וטיפול יומיים בתנאי גידול נטולי אנטיביוטיקה.הדגמה חזותית של הליך זה תסיר את העמימות מהתהליך הקליני המשמש לשחזור דימות עבור הקרנה מדויקת של נפחים קטנים ומוגדרים במוח. את הליך ההקרנה ידגים ד"ר Dante Rowa, פרופסור קליני במחלקה שלי. הכנת תאי הגזע תודגם על ידי הגב' Mary Land ו-Catherine Tran, טכנאיות במעבדה שלי, וד"ר Muja, חוקר פוסט-דוקטורט, ידגים את ההליכים הנדרשים להשתלה.אנו משתמשים בתוכנה לרדיותרפיה מונחית-דימוי לצורך מיקום מדויק של החיה לפני הטיפול, וברדיותרפיה מודולית להקרנה ממוקדת עם מינימום נזקי קרינה לחלקים אחרים של המוח. 24 שעות לאחר סריקת MRI, ייצרו נפח תמונות חתך נוסף על ידי הנחת החיה המורדמת בסורק CT לאונקולוגיה קרינתית. מקמו את החולדה באותו תנוחה שבה נעשה שימוש בסריקת ה-MRI, והגדירו את יחידת ה-CT לסרוק את אזור הגולגולת כדי להפיק את נתוני תכנון הטיפול ב-CT.השג 106 תמונות CT בעובי תמונה של 0.8 מילימטר. לאחר מכן, העבר את נתוני תמונות ה-MRI וה-CT לתוכנת תכנון הטיפול Eclipse. השתמש ב-Eclipse כדי לבצע היתוך (fusion) של נתוני ה-MRI וה-CT בהתבסס על האנטומיה הגרמית והתאמת רקמות רכות.זהו שלב שמשכו משתנה, ובהתאם לאיכות התמונה, תהליך זה עשוי להימשך בין שעה לשלוש שעות. לאחר השגת מיזוג תמונות משביע רצון, סמנו את גבולות האזורים המיועדים להקרנה וכן את האיברים הקריטיים הסמוכים. ניתן להקרין את המוח כולו או להגביל את ההקרנה לאזורים נפחיים ספציפיים, כגון כל אחד מההיפוקמפומים (hippo campi).הקווי המתאר מספקים לא רק את מיקומם של איברים אלו, אלא גם מידע על הנפח שיהיה קריטי להתאמת התפלoutות המינון. כדי להתאים את התפלoutות המינון, הזן מידע על מינון היעד, התאמת היעד (conformity) ומגבלות מינון לאיברים קריטיים בחלון אופטימיזציית המינון ב-eclipse.לאחר יצירת התוכנית, eclipse מספקת את המנה המחושבת הממוקמת מעל לתמונות במישורי ה-axial, ה-coronal וה-sagittal, וכן בפורמט של היסטוגרמה של מנת נפח (dose volume histogram). בשלב זה יש להעריך את התוכנית כדי לקבוע אם היא מתאימה לביצוע או שדורש שיפור. כדי להתחיל בתהליך ההקרנה, יש להניח חולדה תחת השפעת סדציה תחת שמיכת נייר כדי לשמור על חום גופה.לאחר מספר דקות, הנח את החולדה על שולחן הטיפול של המאיץ הליניארי לרדיותרפיה כשהיא מכוסה בשמיכה, אך הגולגולת חשופה. ודא שהיא מונחת באותה תנוחה ששימשה ליצירת סריקת ה-CT. שלב זה הוא קריטי להבטחת דיוק בהגשת המינון.בשלב הבא, השג תמונות רנטגן אורתוגונליות של החולדות המורדמות באמצעות מערכת ההדמיה המובנית במאיץ הקרינה הליניארי, בצע רישום משותף (coregistration) של תמונות הרנטגן האורתוגונליות למערכת תמונות ייחוס המסופקת על ידי Eclipse, והחל את תיקוני המיקום הנדרשים ליישור תמונות תקין. הגש את הקרינה במינון של 10 grade באמצעות תוכנית IMRT בעלת שישה שדות עבור היפוקמפוס בודד, ובתוכנית rapid arc בעלת שני קשתות עבור הקרנה של שני ההיפוקמפוסים. עם השלמת הגשת הטיפול, הוצא את החולדה מחדר הטיפולים ואפשר לה להתאושש בכלוב המתנה מחומם.כדי להכין את החולדה מהזן TN לניתוח, השתמש במכונת גילוח חשמלית כדי להסיר את הפרווה מהראש של חולדה תחת הרדמה. נקה את האזור הגלוח באמצעות יישומים חוזרים של povidone iodine ו-70% ethanol בתוך מapay-flow hood (מCב זרימה למינרית). הכן את המכשירים הסטריאוטקסיים, המקדח המיקרומולרי, סטריליזטור מיטת חום (dry bed sterilizer) ואת הבקרים.שמרו על חום גופו של בעל החיים במהלך הניתוח על ידי הנחתו על משטח מחומם. יש ללבוש כפפות סטריליות לפני הניתוח ובמהלכו, ולהתיז עליהן 70% ethanol. הציוד הניתוחי נשמר תחת מ 빠르게 זרימה למינרית (laminar flow hood) ייעודית.כדי לשמור על תנאים אספטיים, כסו את בעל החיים בסדין כירורגי קטן כך שרק הראש יישאר חשוף. קבעו את ראשו של בעל החיים בתוך המסגרת הסטריאוטקסית על ידי החדרת מוטות אוזניים לתעלת האוזן החיצונית. הפעילו זהירות רבה בעת החלקת קצה מוט האוזן אל תוך תעלת האוזן.מקם את מוט החותכים על ידי תליאת החותכים העליונים של החולדה וכיוון גובה המוט לנקודת הייחוס הסטנדרטית. לאחר מכן, הדק את תפס האף. מרכז את מיקום הראש בין מוטות האוזניים עם תנועה צדית מינימלית כדי להגיע לאפס סטריאוטקסי.לאחר שהחיה ממוקמת בתנוחה המתאימה, יש למרוח פומדת סיכוך לעין כדי למנוע התייבשות. מרח את הפומדת פעם נוספת במהלך הניתוח. באמצעות סקלפל סטרילי, בצע חתך עורי של שני סנטימטרים בקו האמצע לאורך הקרקפת.נקה את האזור באמצעות מקלונו של מקליל צמר סטרילי. לאחר מכן, הכנס רטראקטור לניתוח כדי להחזיק את הפריוסטום פתוח. הפעל לחץ חזק על האזור אם מופיע דימום.באמצעות מקלון עם טיפת צמר טבול ב-1% hydrogen peroxide, הסירו את הרקמות הרכות המכסות את הגולגולת עד שהתפרים bgma ו-lambda יהיו גלויים. ההיבט המאתגר ביותר בניתוח סטריאוטקסי הוא המיקום המדויק של ראש בעל החיים במסגרת הסטריאוטקסית. כדי לסמן קואורדינאטות סטריאוטקסיות מדויקות על גולגולת בעל החיים, השתמשו באטלס מוח של חולדה כדי לקבוע את הקואורדינאטות הסטריאוטקסיות המדויקות תוך שימוש ב-B bgma כנקודת ייחוס. במחקר זה, השתלת תאי גזע מבוצעת בארבעה אתרים נפרדים תוך שימוש בקואורדינאטות סטריאוטקסיות הבאות לסימון המיקומים על הגולגולת; ראשית, זהו את ה-bgma.בצע איפוס (zero) עבור הציר הבא. בצע איפוס לכל שלושת הצירים בבקר התצוגה הדיגיטלי. לאחר האיפוס, השתמש בקואורדינטות שנקבעו מראש כדי לאתר את אתרי השבח ולסמן אותם באמצעות טוש בעל חוד דק המחובר למחזיק פרובה על המסגרת.השתמשו במקדח כדי ליצור חורים בקוטר 0.35 מילימטר דרך הגולגולת בכל אחד מהמיקומים המסומנים. היזהרו למנוע נזק לקרומי הדורה (Durham membrane). אם מתרחש דימום במהלך הקידוח, הפעילו לחץ חזק באמצעות מקלון צמר.הבעל חיים מוכן כעת להשתלה. יש להכין מראש את תאי הגזע העצביים האנושיים המשמשים להשתלה ולשמור אותם על קרח עד למועד השימוש. כאשר אלו מוכנים, מלאו מזרק מיקרו Hamilton בנפח 5 µL ובמספר 30 gauge בתמיסת התאים.חברו את המזרק הממולא למחזיק פרוב קטן על המסגרת הסטריאוקסית. לאחר ההבאה למיקום הנכון, הכניסו בזהירות את קצה המחט לתוך החור בגולגולת עד להגעה לפני השטח של המוח. אפסו את קואורדינטת ה-DV בבקר התצוגה הדיגיטלי ולאחר מכן הכניסו בעדינות את המחט לעומק הרצוי.השאירו את המחט במקומה למשך דקה אחת. לאחר זמן זה, הזריקו תאים בקצב של 0.25 µL לדקה, עד לנפח כולל של 1 µL. השאירו את המחט במקומה למשך שמונה דקות לפני הנסיגה כדי למנוע רפלקס קפילרי של תכולת ההזרקה בחזרה דרך נתיב המחט. הסיגו את המחט לאט מאתר הש transplantation בקצב של 0.5 mm לדקה.חזור על הליך זה עבור שאר אתרי ההשתלה. עם סיום ההזרקות, הסר את רתק העור והשתמש בפינצטה קהה כדי למשוך בעדינות את העור בחזרה מעל הגולגולת. סגור את הפצע באמצעות ארבעה עד חמישה סנפירי סגירה סטריליים מפלדת אל-חלד לאחר הניתוח.הניחו את בעל החיים בכלוב מחומם ועקבו אחר התאוששותו. חודש לאחר השבחה, נחתכו דגימות מוח ונצבעו ב-BRDU לצורך זיהוי של NSCS שהושתלו, ובנוסף נבצעו צביעות נגד עם hematin. נתיב המחט, המיוצג כאן על ידי הקו האדום, מציין את מסלול ההזרקה שבו הופקדו ה-NSCS באתר שחרור השבחה המסומן כ-TR, כפי שניתן לראות.כאן, תאי ה-NSCS שהושתלו הראו נדידה נרחבת מאזורי ה-corpus cossum וה-CA one לאזורי ה-dente gyrus וה-ca three של ההיפוקמפוס. חשוב שסט תמונות ה-Mr.I שנרכש יותאם במדויק לסט תמונות CT תואם. מיזוג תמונות תקין הוא קריטי לזיהוי ולתיחום לאחר מכן של אזורי ההיפוקמפוס לפני הליך הטיפול; רכשו תמונות רנטגן אורתוגונליות כדי להבטיח שהבעל חיים ממוקם במדויק. כדי להבטיח את הצלחת ההשתלה, שמרו על סביבה כירורגית סטרילית בכל עת.סמנו את קואורדינטות Otax במדויק והוציאו את המיקרו-מזרק לאחר ההזרקה בהדרגה כדי למנוע רפלקס של הנוזל. לאחר צפייה בסרטון זה, תהיו בעלי הבנה טובה של ביצוע הליך הקרנה בעל רלוונטיות קלינית באמצעות מודל בעלי חיים לבחירתכם, וכיצד להשתיל תאי גזע בניתוח לאזור מדויק במוח.

stem-cell-transplantation-strategies-for-restoration-cognitive

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

השתלת מבשר עצבית היא אסטרטגיה מבטיח הגנה ו / או החלפת אבוד / נוירונים מתפקדת צוואר הרחם מנוע הסרעפת של פגיעה בחוט השדרה (SCI) לבין הנוירון המוטורי הפרעה, amyotrophic laterals טרשת (ALS). אנו מספקים פרוטוקול למסירה התא בחוט השדרה הצווארי קרן הגחון במודלים של מכרסמים ALS ו SCI.

Intraspinal השתלת תאים עבור מיקוד הורן הגחון צוואר הרחם ב טרשת לרוחב amyotrophic וקורד טראומטית פגיעה בעמוד השדרה

ליקוי קוגניטיבי הנובע מטיפול רדיותרפי בגידולי מוח מהווה מצב קליני שקשה לטיפול, המשפיע לרעה על איכות החיים. היכולת להעריך באופן ביקורתי התערבויות פוטנציאליות לשיפור פגיעות קוגניטיביות הנגרמות מקרינה תלויה בסופו של דבר ביכולת לבצע הערכות כמותיות קפדניות של התפקוד הקוגניטיבי.

כימות decrements קוגניטיבי נגרמת על ידי הקרנות גולגולתי

מקור: Furmanski, O., et al. מודל השפעה מבוקרת בקליפת המוח של פגיעה מוחית בעכבר עם השתלה טיפולית של תאים עצביים שמקורם בתאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם. J. Vis. Exp. (2019)בסרטון זה, תאים עצביים פלוריפוטנטיים שמקורם בתאי גזע המושרים על ידי בני אדם מוזרקים באופן סטריאוטקסי לגבול החומר האפור-לבן של קליפת המוח העמוקה במודל עכבר של פגיעה מוחית טראומטית. התאים המושתלים משתלבים ברקמה, ומקדמים התאוששות תפקודית ותיקון מעגלים במוח הפגוע.

השתלה סטריאוטקסית של תרחיף תאים עצביים בעכבר עם פגיעה מוחית טראומטית

תאי גזע הם מבטיחים לספקים טיפוליים לטיפול בגידולים במוח בשל הטרופיזם של הגידול הפנימי שלהם. לא פולשני אינטראנסלי תא גזע המסירה עוקף את מחסום דם מוח ומראה פוטנציאל חזק לתרגום קליני. מאמר זה מסכם את העקרונות הבסיסיים של אספקת תאי גזע אינראנסאלי במודל עכבר של גליומה.

אספקה ​​אינטראנסלית של תאים בתאי גזע כדי גליובלסטומה במודל עכבר

שוחרת הגידול טיפולית בתאי גזע mesenchymal (MSCs) מבטיחים לטיפול פולשני גליובלסטומה. השתלת אופטימלית כולל משלוח של MSCs לתוך חלל כריתה הגידול על פיגומים. כאן, טכניקות פרה כדי ללמוד טיפול MSC גליובלסטומה הינם מסופקים לרבות: כריתה הגידול תמונה מונחה; השרשת נזרע MSC פיגומים; טיפול לאחר הניתוח מעקב.

תמונה מונחה כריתה של גליובלסטומה, ההשתלה תוך-גולגולתי של פיגומים נזרע תאי גזע טיפולית

כאן, אנו מציגים את פרוטוקול על ההכנה ועל המינהל stereotaxic של לימפוציטים אנושיים allogeneic בעכברים immunodeficient נושאת גידולים במוח העיקרי אנושי orthotopic. מחקר זה מספק הוכחה-של-קונספט הכדאיות והן את היעילות antitumor של המועבר intrabrain immunotherapies הסלולר.

העברת סטיאוטטי המאמצת של תאים חיסוניים ציטוטוקסיות במודלים מאתר של האדם Orthotopic גליובלסטומה Xenografts

פרוטוקול זה מדגים מתודולוגיות עבור מודל העכבר של פגיעה במוח הגולגולת טראומה טראומטית השתלת הגוף האנושי המושרה pluripotent שפעה התאים הנגזר לתוך האתר פציעה. מבחנים התנהגותיים והיסטולוגיים של תוצאות מהליכים אלה מתוארים גם בקצרה.

מבוקרת מודל השפעה בקליפת המוח של פגיעה במוחו של העכבר עם השתלת הטיפולית של האדם המושרה Pluripotent תא גזע תאים הנגזרים

אנו מתארים את ההשתלה התוך-פרנכימלית של תאי אב עצביים אנושיים שעברו התמרות עם וקטור מדווח כפול המבטא חלבון פלואורסצנטי ירוק-לוציפראז (GFP) במוח העכבר. לאחר ההשתלה, אות הלוציפראז נמדד שוב ושוב באמצעות תאים מושתלים in vivo bioluminescence ותאים מושתלים המבטאים GFP שזוהו בחתכי מוח באמצעות מיקרוסקופיה פלואורסצנטית.

השתלה תוך-מוחית ומעקב ביולומינסנציה In Vivo של תאי אב עצביים אנושיים במוח העכבר

גידולים במערכת העצבים המרכזית (CNS) הם הגורם המוביל למוות הקשור לסרטן בקרב ילדים, וטיפולים מבוססי מערכת החיסון נבדקים יותר ויותר עבור חולים בניסויים קליניים. פרוטוקול זה מתאר שיטות להשתלת צינורית לוקו-אזורית בעכברים לצורך הערכה פרה-קלינית של עירויים אימונותרפיים המכוונים לגידולים במערכת העצבים המרכזית.

השתלת צינורית תוך גולגולתית עבור קולטן אנטיגן כימרי טורי (CAR) עירוי תאי T בעכברים

מחקר זה מציג פרוטוקול חדש לגירוי זרם ישר טרנס-גולגולתי (tDCS) בשילוב עם גירוי קוגניטיבי לטיפול בהזנחה המי-מרחבית לאחר שבץ מוחי. נתונים ראשוניים ממטופל פיילוט מבטיחים את היתכנות ההליך ומצביעים על יעילות פוטנציאלית, ומספקים בסיס לניסוי קליני מקביל, משולש סמיות ומבוקר בעתיד.

ניסוי אקראי, תלת סמיות ומבוקר מקביל של גירוי זרם ישר טרנס-גולגולתי לשיקום קוגניטיבי לאחר שבץ מוחי

למדו שיטה לשתלת תאי גזע עצביים אנושיים בהיפוקמפוס של עכברושים לאחר הקרנת גולגולת. שיטה זו מאפשרת לחקור שיקום תפקוד קוגניטיבי ונדידת תאים לאחר טיפול בקרינה.

גזע להשתלות אסטרטגיות Cell לשיקום של ליקוי קוגניטיבי נגרמת על ידי הקרנות גולגולתי

גלה סרטונים נוספים