יצירת תאי עצב ותאי גליה מגופי עובר פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם

קחו גופים עובריים, או EBs, שמקורם בתאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם. EBs אלה מורכבים משלוש שכבות נבט.

מעבירים את ה-EBs לתבנית תרבית מצופה מטריצה המכילה מדיום מתאים ומדגרים.

המטריצה מאפשרת ל-EBs להתחבר לצלחת התרבית.

גורמי הגדילה והחומרים המזינים במדיום מאפשרים לתאים האקטודרמליים של ה-EBs ליצור אגרגטים נוירו-אפיתליים המסודרים בתבנית מעגלית הנקראת שושנה.

חותכים את שברי הרוזטה ומנתקים אותם מהצלחת.

אוספים את השברים וסובבים אותם כלפי מטה.

השליכו את הסופרנטנט והשעו מחדש את השברים.

בעזרת פיפטה, הזיזו את השברים למעלה ולמטה כדי לנתק אותם.

הוסף את מספר התאים הרצוי לצלחת באר מצופה מטריצה המכילה מדיום התמיינות.

מרכיבי מדיום ההתמיינות מאפשרים לתאי הנוירו-אפיתל להפוך לתאי עצב וגליה מתפקדים במלואם, התאים הראשוניים של מערכת העצבים.

ביום השני, שאפו תמיסת ציפוי מטריצה סטנדרטית מכלי של 60 מיליליטר שהוכנו בעבר, והוסיפו 5 מיליליטר של מדיום אינדוקציה נוירו-אפיתל שלם או NRI למנה. בעבודה תחת המיקרוסקופ הסטריאוסקופי בהגדלה פי 4, ובאמצעות פיפטה של 200 מיקרוליטר, אוספים כ-50 גופים עובריים צפים ומעבירים לצלחת מצופה אחת. לאחר מכן, דגרו את המנה בחום של 37 מעלות צלזיוס ו-5% פחמן דו חמצני.

למחרת, היום השלישי של הליך ההתמיינות, בדוק את הצלחת מתחת למיקרוסקופ בהגדלה של פי 10 כדי לוודא שכל הגופים העובריים