גידול ותחזוקה של תאי עצב דופמינרגיים מרקמת מוח עוברית של עכבר

טפל ברקמת המוח התיכון העוברית, העשירה בנוירונים דופמינרגיים מתפתחים, עם תמיסת טריפסין-EDTA כדי לנתק אותם ממטריצת הרקמה.

הוסף מדיום השבתה כדי לעכב את פעילות האנזים, ולאחר מכן שטוף כדי להסיר שאריות אנזימים.

פיפטה את הטישו שוב ושוב. לנוירונים העובריים יש פחות הקרנות, מה שמפחית את הלחץ במהלך הפרעה זו ויוצר תרחיף חד-תאי.

צנטריפוגה והסירו את הסופרנטנט, ואז השעו מחדש את הנוירונים בתווך שלם. העבירו את הנוירונים הללו לכיסוי מצופה פולימר לחיבור תאים.

הנח את הכיסוי בצלחת מרובת בארות עם מדיום שלם, המספק חומרים מזינים וגורמי גדילה החיוניים לצמיחת נוירונים.

האנטיביוטיקה במדיום מונעת צמיחת חיידקים, ותומכת בכדאיות עצבית.

כאשר נוירונים גדלים ומתבגרים, הם מפתחים הקרנות תאיות, כגון אקסונים ודנדריטים, ויוצרים קשרים סינפטיים.

מעת לעת, הסר מחצית מהמדיה המשומשת כדי לחסל תוצרי לוואי רעילים.

הוסף מדיום טרי לתחזוקה ארוכת טווח של הנוירונים הדופמינרגיים.

מתחת למכסה המנוע, הסר את ה-HBSS מאוסף המוח התיכון הגחוני. לאחר מכן, הוסף מיליליטר של 0.05% טריפסין-EDTA חם, תמיסה המספיקה ל -12 חתיכות רקמה. דגרו על הרקמה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 5 עד 10 דקות. מתחת למכסה המנוע, החלף את הטריפסין-EDTA ב-1 מיליליטר של מדיום השבתה.

סובבו בעדינות את התערובת, ולאחר מכן הסירו את אמצעי ההשבתה, אך השאירו מספיק מדיום מאחור כד