אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 4:48 דק׳ • July 8th, 2025
התחל עם שברי רקמת גזע מוח המכילים גליומה פונטינית פנימית מפוזרת, גידול שמקורו בתאי אב גליה בסביבה עשירה בעצבים מיאליניים.
לטפל באנזימים פרוטאוליטיים כדי לפרק את המטריצה החוץ-תאית של הרקמה.
לאחר הדגירה, יש לזרוק שוב ושוב את התוכן כדי להקל על דיסוציאציה של התאים ופירוק מעטפת המיאלין.
מסנן וצנטריפוגה לאיסוף התאים. הסר את הסופרנטנט והשהה אותם מחדש במאגר קר.
הוסף תמיסת סוכרוז להפרדת שיפוע צפיפות וערבב היטב.
לאחר מכן, צנטריפוגה כדי להפריד את התאים הכבדים יותר מפסולת המיאלין הקלה יותר.
הסר את שכבת המיאלין והוסף מאגר ליזה RBC.
הוסף חיץ קר כדי לעצור את פעולת הליזיס. צנטריפוגה והסר את הסופרנטנט כדי לחסל את ה-RBCs הליזים.
השעו מחדש את התאים במדיום נוירובזאלי חם ותרבו אותם בבקבוק לא מצופה.
היעדר גורמים נוירוטרופיים גורם למוות עצבי, בעוד שתאי אב הגליה מנצלים חומרים מזינים וגורמי גדילה, מה שמוביל לשגשוג. הוסף מדיום טרי כדי לשמור על רמות מקדם הגדילה.
עם הזמן, תאים אלה מצטברים באופן ספונטני לאשכולות תאים, ויוצרים נוירוספרות צפות חופשיות.
בהליך זה, צנטריפוגה את הצינור החרוטי המכיל את שברי הרקמה הנותרים למשך חמש דקות. לאחר מכן, הסר את הסופרנטנט והוסף את תמיסת העיכול האנזימטית המחוממת מראש כך שיש 5 מיליליטר תמיסת עיכול לכל מיליליטר רקמה. לאחר מכן, אטמו את מכסה הצינור החרוטי בסרט מעבדה ודגרו את התגובה
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים