בידוד וטיפוח אבות נוירונים גרעיניים של המוח הקטן מורין

קחו למשל גור עכברים קטן.

הומוגניזציה שלהם לשברים קטנים יותר.

הוסיפו אנזים פרוטאוליטי כדי לעכל את המטריצה החוץ-תאית של הרקמה, לשחרר אבות גרגירים במוח הקטן, או CGNPs, ואסטרוציטים.

הוסף מצע תרבית CGNP המכיל סרום כדי לעצור את הפעילות האנזימטית. צנטריפוגה והשליכו את הסופרנטנט העשיר באנזימים.

השהה מחדש את שברי הרקמה במדיית CGNP. לנתק את הרקמה באופן מכני כדי לשחרר את התאים.

ברגע שהפסולת שוקעת, העבירו את הסופרנטנט שמכיל את התאים לצינור חדש.

צנטריפוגה והסר את הסופרנטנט עם פסולת.

השעו מחדש את התאים במצע CGNP, וזרעו אותם על בארות צלחות מרובות בארות המצופות בפולי-D-ליזין. דגירה.

אסטרוציטים מתיישבים ונצמדים חזק לציפוי הפולי-D-ליזין, בהשוואה ל-CGNPs.

נער את הצלחת ואסוף את הסופרנטנט המכיל CGNPs. צנטריפוגה והסר את הסופרנטנט.

השעו מחדש CGNPs במדיית CGNP וזרעו אותם על צלחת מרובת בארות מצופה פולי-L-ornithine. דגירה.

CGNPs נצמדים למשטח המצופה ומתרבים, בסיוע רכיבי המדיה ופולי-L-אורניתין.

העבירו שלושה עד חמישה צרבלה לצינורות של 15 מיליליטר. שטפו את המוח הקטן עם גלוקוז HBSS לפני הצנטריפוגה. צנטריפוגה את הצינורות כדי לאסוף את הרקמה. לאחר הכביסה הסופית, הומוגניזציה של המוח הקטן על ידי פיפטינג בעדינות למעלה ולמטה פעמיים-שלוש עם פיפטה של 1 מיליליטר עד שהשברים בגודל של 0.5 עד 1 מילימטר קוביות.

הסר בעדינות את