התמיינות תאי גזע עצביים לתאי עצב באמצעות מכשיר מיקרופלואידי ממודר

קח מכשיר מיקרופלואידי, המורכב מבארות מאגר המחוברות לשני תאים, סומטי ואקסונלי, המופרדים על ידי מחסום מיקרו-חריץ.

התאים והמיקרו-חריצים מצופים במצע תרבית תאים כדי להקל על הידבקות התאים.

הוסף מדיום תאי גזע עצבי לכל באר ודגר כדי להכשיר את המכשיר לתרבית תאים.

השלך את המדיה. הוסף תאי גזע עצביים, או NSCs, לבארות התא הסומטי ואפשר לתאים להיצמד

.

הוסף את מדיום ה-NSC לכל באר ודגר בתא לח כדי למנוע אידוי מדיה. במהלך הדגירה, ה-NSCs מתרבים.

החלף את מדיום ה-NSC במדיום התמיינות עצבי ודגירה.

המולקולות הקטנות במדיום גורמות להתמיינות של NSCs לנוירונים בתוך התא הסומטי, כאשר האקסונים שלהם משתרעים דרך המיקרו-חריצים לתוך התא האקסונלי.

הנוירונים המובחנים עם אקסונים מורחבים מוכנים לבדיקות נוספות.

כדי להתחיל, ממיסים פולי-ל-אורניתין במים מזוקקים בדרגת תרבית תאים כדי ליצור 600 מיקרוליטר של תמיסה לכל שבב. שאפו את ה-PBS הנותר מהבארות, וודאו שקצה הפיפטה רחוק מפתח התעלה. טען 150 מיקרוליטר של תמיסת עבודה פולי-ל-אורניתין בבאר הימנית העליונה.

המתן 90 שניות והוסף 150 מיקרוליטר מהתמיסה לבאר הימנית התחתונה. המתן חמש דקות וחזור על תהליך הטעינה עם התמיסה לבארות השמאליות. לאחר מכן, הניחו את מגש האדים עם השבב על 4 מעלות צלזיוס למשך הלילה. אם משתמשים בצלחת פטרי, עטפו אותה בפרפילם והניחו אותה על 4 מעלות צלזיוס למשך הלילה.

לאחר