טכניקה לבידוד תאי לוויין מרקמת שריר ראש חולדה

התחל עם שריר ראש חולדה וקוצץ אותו לשברים.

הוסיפו קוקטייל של אנזימים מפרקי חלבון ודגרו בניעור עדין.

האנזימים מעכלים את המטריצה החוץ-תאית של הרקמה, ומשחררים את סיבי השריר.

הוסף מדיה המכילה חלבוני סרום כדי לנטרל את האנזימים.

העבירו את הרקמה לצינור, צנטריפוגה והשליכו את הסופרנטנט.

השעו מחדש את הרקמה במדיה. חזור על שיבוש מכני וצנטריפוגה פעמיים כדי להשיג תרחיף הומוגני של תאי לוויין - תאי גזע החיוניים לתיקון והתחדשות שרירים.

אספו את הסופרנטנט המכיל תא לווין.

עוברים דרך מסננת תאים כדי לקבל מתלה חד-תאיים. צנטריפוגה, השליכו את הסופרנטנט והשעו מחדש את התאים במדיה.

הנח טיפות של תרחיף התאים על בארות שקופיות תא מצופות חלבון מטריצה חוץ-תאית.

המשטח המצופה מקל על חיבור תאי לוויין. הוסף מדיה לבארות.

גורמי גדילה במדיה גורמים לשגשוג והתמיינות של תאי לוויין למיובלסטים - מבשרי תאי שריר, אשר מתרבים עוד יותר ומתמזגים ליצירת צינורות שריר מרובי גרעינים.

השרירים מבשילים בסופו של דבר לסיבי שריר.

כדי לבודד את תאי הלוויין, העבירו כל שריר לבארות בודדות של צלחת של שש בארות, וחתכו את הרקמות לחתיכות קטנות של 2 מילימטרים, תוך הקפדה לא לטחון את השרירים יותר מדי. לאחר מכן, דגרו בזהירות את שברי הרקמה ב -2.5 מיליליטר של תמיסת פרונאז 0.1% לבאר בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 60 דקות, בניעור עדין, כל 20 דקות.

כאשר צרורו