אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 4:35 דק׳ • July 8th, 2025
קחו לדוגמה קליפת עכבר טרנסגנית המכילה נוירונים המבטאים חלבון פלואורסצנטי.
אבטח אותו על מחזיק מדגם.
התקן את המחזיק על מגש הוויברטום המכיל aCSF מחומצן כדי לשמור על התנאים הפיזיולוגיים של הרקמה.
בעזרת פרמטרים מוגדרים, השג פרוסות עטרה.
מניחים את הפרוסות במחזיק רשת המכיל aCSF מחומצן וחוסמי פעילות כדי לייצב אותן.
טפלו בפרוסות בפרוטאזות כדי לעכל את המטריצה החוץ-תאית ולשחרר תאים.
שטפו עם aCSF כדי להסיר את הפרוטאזות.
מעבירים את הפרוסות לצלחת תרבות עם aCSF וסרום.
תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי, נתחו אזורי פרוסות המכילים נוירונים פלואורסצנטיים.
העבירו את השברים המנותחים לצינור המכיל aCSF וסרום.
נתק מכנית את הרקמה ליצירת תרחיף חד-תאי. העבירו את התאים לצלחת תרבית המכילה aCSF.
תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי, השתמשו בפיפטה נימית כדי לאסוף נוירונים פלואורסצנטיים.
חלק את הנוירונים הללו לתוך צלחת תרבית המכילה aCSF להמשך ניתוח.
נתח את המוח מעכבר שהורדם על ידי פתיחת הגולגולת עם מספריים קטנים, וחילוץ המוח הטרי באמצעות מלקחיים עדינים מבלי לפגוע בקליפת המוח. הנח את המוח ב-aCSF מקורר ומחומצן, והשאיר אבן אוויר מחוברת לחמצן מאוזן של 5% פחמן דו חמצני במשך כל משך החיתוך.
מקם את המוח על צ'אק הוויברטום, וחתוך חלקים עטרתיים או סגיטליים בעובי של 300 מיקרון. אסוף כמה חלקים שצריך כדי להשיג מינימום של 10 עד 50 תאים מסומנים. ש
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים