הכנת צלחות תרבית ממודרות מצופות קולגן לתרבית תאי עצב

התחל בהוספת תמיסת קולגן לכלי תרבית.

ה-pH החומצי של התמיסה מונע היווצרות מטריצת קולגן.

הסר את התמיסה העודפת.

מניחים את המנה במגש יחד עם כרית גזה ספוגה באמוניום הידרוקסיד. הניחו מכסה שיכיל אדי אמוניה.

אדים אלה מעלים את ה-pH, ומנטרלים את הסביבה החומצית.

נטרול משבש את הדחייה האלקטרוסטטית בין מולקולות קולגן, ומאפשר להן ליצור מטריצה יציבה. צור שריטות אופקיות על פני המרכז.

מרחו גריז לא מגיב על בסיס תא מדור.

כעת, חבר את המשטח השרוט של המנה לתא.

הפוך ומרח את השומן כדי לאטום את התא המרכזי.

הוסף מדיה כדי לבדוק אם יש דליפה. אטום את הדליפה בשומן.

זה יוצר מערכת בת שלושה תאים: התא המרכזי לתאי עצב ותאי הצד לגידולים.

תאים עצביים גדלים לאורך שריטות לתאים צדדיים ומייצרים מעטפת מיאלין על אקסונים, מה שמקל על חקר האינטראקציה בין הגידול לתאי הגידול.

כדי להרכיב כלי תרבית ממודרים, יש לדלל את תמיסת מלאי הקולגן ל -500 מיקרוגרם למיליליטר במים מזוקקים סטריליים ולערבב היטב. בעזרת פיפטת העברה סטרילית, מלאו צלחת תרבות בגודל 35 מילימטר עם 2 מיליליטר מתמיסת הקולגן המדוללת. לאחר מכן, הטה מעט את המנה והסר את התמיסה, והשאיר אחריו סרט דק של קולגן. מחלקים את התמיסה למנה הבאה של 35 מילימטר. חזור על תהליך זה, הוסף עוד תמיסת קולגן לפי הצורך עד שכל הכלים מצופים.

כדי לפלמר את הקולגן במכסה זרימה למינרית, רפידות גזה רטובות עם