טיפול בתרביות תאי גזע עצביים במתקן לייצור תאים

כדי למזער את הזיהום בתרביות תאי גזע עצביים, השתמשו במתקן עם מכסה מנוע למינר, תא חיץ, תא תהליך ותא מיקרוסקופ, שכל אחד מהם מופרדים על ידי דלתות אטומות.

כעת, מלאו מים בצלחת תרבית בחממה כדי לשמור על הלחות.

התאם את תא החיץ, תא התהליך ופרמטרי החממה לרמות אופטימליות.

נקו את כל המשטחים בעזרת חומר חיטוי וגזה סטרילית כדי לחסל מזהמים מיקרוביאליים.

הנח תחילה את לוחית תרבית תאי הגזע העצבית במכסה המנוע הלמינרי המספק אוויר מסונן.

נגב את החלק החיצוני של הצלחת עם גזה ספוגה באתנול ולאחר מכן העביר אותו לתא החיץ המספק אוויר מסונן עם רמות גז אופטימליות.

לבסוף, העבירו את הצלחת דרך תא התהליך לתוך החממה וסגרו את הדלת.

לאחר הדגירה, העבר את צלחת התרבות בחזרה לתא התהליך יחד עם מדיום טרי כלשהו.

לאזן את המדיום הטרי.

רעננו את המדיום בצלחת התרבות ודגרו מחדש את הצלחת.

מניחים שלוש צלחות פטרי בתבנית המים בבסיס כל חממה. מלאו את הכלים הללו במים סטריליים, ושמרו על מפלס המים בכלים אלה מכיוון שהם קריטיים לשמירה על נקודת הלחות היחסית באינקובטור.

בתוך הממשק הגרפי, לחץ על Incubator. לאחר מכן, לחץ על הערך הקיים עבור לחות יחסית מתחת לנקודת ההגדרה והזן 85%. לאחר מכן, לחץ על סימן הביקורת הירוק כדי לקבל ערך זה.

לאחר מכן, התאם את תאי החיץ, תא התהליך והחממה לנקודות הגדרת הגז הנדרשות לסוג התאים המוצגים. נקו את פני תא התהליך בעזרת גזה סטרילית, וחומר חיטוי שאינו דליק, כגון מוצרים מבוססי בנזלקוניום כלוריד.

לאחר מכן, נקה את הכפפות והמשטחים שנוגעים בהם לעתים קרובות, כגון ידיות דלתות. לאחר מכן, נקו את פני מכסה המנוע ותא החיץ עם 70% אתנול והניחו לו להתייבש.

לאחר מכן, הניחו את הבקבוק או צלחת התאים במכסה המנוע, ונגבו לזמן קצר את המשטח החיצוני שלו עם ספוג גזה סטרילי רווי אתנול. לאחר מכן, הכניסו את הבקבוק או הצלחת לתא החיץ והפעילו גורם דילול. בסיום, העבירו מיד את הבקבוק או הצלחת לחממה המתאימה.

מכיוון שהחממה נמצאת בחלק האחורי של תא התהליך, משוך מדף החוצה לתוך תא התהליך למיקום התאים והימנע מפתיחת דלתות החממה שלא לצורך או לפרקי זמן ממושכים.

בשלב זה, הכינו את מדיום תרבית התאים. אפשר למדיום להתייצב עם רמות הפחמן הדו חמצני והחמצן הקיימות במערכת על ידי השארת מיכל המדיה מעט לא מכוסה למשך 20 דקות.

לאחר מכן, הסר את המדיום הישן מהבארות. עבור תאי גזע פלוריפוטנטיים, הסר כמעט את כל המדיום הישן עם כמות קטנה של המדיום הישן שנותר, כדי למנוע התייבשות במהלך תהליך ההאכלה. עבור תאי גזע עצביים, הסר מחצית מהמדיום הישן. לאחר מכן, הוסיפו מדיום טרי לצלחות תרבית התאים, והניחו את הצלחות בחזרה לחממה המיועדת להן.