יצירת תאי אנדותל במוח מתאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 4:35 דק׳ • July 8th, 2025
יש ליטול תרבית תאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים, או iPSC, במצע תחזוקה המכיל מעכבי רו-קינאז.
גורמי גדילה שומרים על תאים לא ממויינים, בעוד שמעכבי רו-קינאז משפרים את הישרדות התאים.
החלף את המדיה באמצעי תחזוקה טריים, והסר מעכבי רו-קינאז. דגירה, קידום היווצרות מושבות.
החלף באופן קבוע במדיה לא מותנית, המספקת סביבה מבוקרת, ומפעילה התמיינות iPSC לאבות עצביים ולאחר מכן לתאי אנדותל במוח, ולאחר מכן התפשטות תאים.
החלף במדיה תאי אנדותל המכילה חומצה רטינואית וגורמי גדילה פיברובלסטים. דגירה.
גורמי גדילה פיברובלסטים מקלים על התפשטות התאים, בעוד שחומצה רטינואית מקדמת את הבשלת תאי האנדותל במוח.
הוסף אנזימים פרוטאוליטיים כדי לנתק את התאים. אוספים את התאים והצנטריפוגה. השליכו את הסופרנטנט.
השעו מחדש את התאים במדיה אנדותל וזרעו אותם על גבי תוספת ממברנה מרובת בארות המצופה בקולגן ופיברונקטין.
הבאר מכילה מדיה אנדותלית. דגירה להדבקה סלקטיבית של תאי אנדותל במוח.
החלף את המדיה במדיה אנדותל ללא תוספת לניסויים נוספים.
יש להשעות 7.5 x 105 תאים ב-12 מיליליטר של מדיום תחזוקת תאי גזע ו-10 מעכבי ROCK מיקרו-מולרי. שאפו מטריצה מבקבוק T75 והעבירו את תרחיף התא לבקבוק. נענע את הבקבוק כדי להפיץ את התאים, והניח אותו בחממה.
רענן את המדיה מדי יום במשך היומיים הקרובים כדי להסיר את מעכב ROCK ולתמוך בצמיחה של מושבות תאי גזע. ביום
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים