אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 3:52 דק׳ • July 8th, 2025
קח רקמות שומן פריאורטיות של עכברים טרנסגניים שנקטפו המכילות תאי גזע שמקורם בחלבון פלואורסצנטי שמקורם בתאי פסגה עצבית, או NCCs.
הוסף מצע עיכול וטחן את הרקמות.
העבירו את הרקמה הטחונה עם אמצעי העיכול לצינור. נתק מכנית את השברים.
דגירה. קולגנאז במדיה מעכל את המטריצה החוץ-תאית של הרקמה, ומשחרר תאי גזע, אדיפוציטים ופיברובלסטים.
הוסיפו מדיה המכילה סרום כדי לעצור את פעילות הקולגנאז. צנטריפוגה והשליכו את הסופרנטנט המכיל אדיפוציטים.
השעו מחדש את התאים במדיה וסננו כדי להסיר אגרגטים.
צנטריפוגה את המסנן והסר את הסופרנטנט. השעו מחדש את התאים במאגר ליזה של אריתרוציטים כדי ליז אריתרוציטים.
הוסף מאגר המכיל סרום כדי לעצור את הליזה. צנטריפוגה והשליכו את הסופרנטנט.
השעו מחדש את התאים במאגר.
בצע מיון תאים המופעל על ידי פלואורסצנטיות כדי לבודד תאי גזע פלואורסצנטיים.
תאי הגזע המבודדים יכולים לשמש לניסויים נוספים.
העבירו את רקמת השומן שנקטפה לתוך צינור מיקרו-צנטריפוגה חדש של 2 מיליליטר, המכיל 1 מיליליטר של מדיום עיכול טרי שהוכן והשתמש במספריים כירורגיים כדי לטחון את הרקמות. העבירו את תמיסת הרקמות לתוך שפופרת של 50 מיליליטר המכילה 9 מיליליטר של מדיום עיכול טרי, והשתמשו בפיפטה של 1 מיליליטר כדי לשלש את הרקמות 10 פעמים.
כאשר התקבלה תמיסה הומוגנית, דגרו את הצינור למשך 30 עד 45 דקות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיו
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים