אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 5:34 דק׳ • July 8th, 2025
קח קטע מעמוד השדרה של חולדה וחלקו אותו כדי להסיר את חוט השדרה.
נתק את גרעיני השורש הגביים, או DRGs, מקבץ של נוירונים המוקפים בתאי גליה לווייניים, או SGCs.
הנח את ה-DRGs במצע גידול. הסר את שורשי העצבים כדי להפחית את זיהום SGC.
טפלו בקולגנאז כדי לפרק את מטריצת הרקמות ושטפו כדי להסיר את האנזימים.
הכנס טריפסין כדי לשבש חיבורים בין-תאיים. הוסף סרום המכיל חלבונים המנטרלים טריפסין.
הוסף את מצע הגידול ונתק מכנית את הרקמה. סנן את התרחיף כדי לבודד תאים בודדים וצנטריפוגה להסרת פסולת רקמות.
השעו מחדש את התאים כדי לשכב אותם על מדיום שיפוע צפיפות, וצנטריפוגה.
נוירונים בעלי צפיפות גבוהה יותר מתיישבים בתחתית, מה שמקל על הפרדת SGCs.
השעו מחדש את הנוירונים במדיום תרבותי. העבירו אותם לבאר מצופה מצע תרבית, המאפשרת חיבור תאים.
תוסף עם גורמי גדילה עצביים להישרדות עצבית.
כדי להשיג את נוירוני ה-DRG לאחר קצירת חוט השדרה, התחל בהסרת כל חלקי הגב ולאחר מכן, השתמש במספריים כירורגיים סטריליים וחדים כדי לחלק את עמוד השדרה לשניים לאורך ציר האורך, תוך חשיפת רקמת החבל. חתכו את עמוד השדרה לשני מקטעים קטנים יותר מתחת לגובה כלוב הצלעות, ולאחר מכן השתמשו במלקחיים עדינים כדי להסיר בעדינות את כל רקמת הטבור, תוך הקפדה לא למשוך ולהסיר את שורשי ה-DRG, המופיעים כחוטים לבנים היוצאים ישירות מהתעלות.
לאחר הסרת כל רקמת הליבה, הש
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים