JoVE Encyclopedia of Experiments
מדעי המוח
0 צפיות • 2:12 דק' • July 8th, 2025
בתגובה לגירויים חיצוניים, תאי גזע עצביים של מוח דרוזופילה, או NSCs, יוצאים משקט, מצב של עצירת מחזור התא, ומופעלים מחדש כדי להתחיל להתפשט.
קחו למשל זחלי דרוזופילה שזה עתה בקעו, שלב שבו תאי גזע גזעיים יוצאים באופן טבעי מהשקט in vivo.
אחוז בפה ווים ובגוף כדי לפצל את הזחל.
אתר את המוח מאחורי ווי הפה וכרת אותו.
העבירו את המוחות לבארות צלחות תרבית המכילות מדיה.
בבארות מטופלות, המדיה מכילה הורמון בדיקה, בעוד שבארות בקרה חסרות את ההורמון. דגירה.
בתנאי בקרה, ה-NSCs נשארים שקטים בגלל היעדר גירויים חיצוניים.
בבארות מטופלות, ההורמון נקשר לקולטני NSC ספציפיים, מפעיל מסלולי איתות במורד הזרם ומפעיל מחדש את תאי הגזע.
תאי הגזע העצביים המופעלים מחדש נכנסים למחזור התא ועוברים התפשטות.
לאחר הדגירה, המוחות מוכנים כעת לניתוח במורד הזרם כדי להמחיש את התפשטות ה-NSC, המאשרת את פוטנציאל ההפעלה מחדש של ההורמון.
נתחו את המוחות מהזחלים שהונחו בצלחת שעון הזכוכית השנייה עם SSM, באמצעות מלקחיים תחת מיקרוסקופ מנתח והתאמת ההגדלה לפי הצורך. השתמש במלקחיים אחד כדי לתפוס את ווי הפה, ועם השני, תפוס בעדינות את הגוף באמצע הדרך כלפי מטה, ומשוך בכיוון ההפוך כדי לפצל את הזחל לשני חלקים. לאחר ניתוח 15 עד 20 מוחות, הוסף 1 מיליליטר של SSM לבאר אחת של מגש תרבית סטרילי של 24 בארות. באמצעות מיקרופיפטה וקצה סטרילי, העבירו את המוחות הטריים שנותחו לתוך ה-SSM, ולאחר מכן דגירה של המדיה עם מוחות למשך 24 שעות בטמפרטורה של 25 מעלות צלזיוס.