בידוד אוליגודנדרוציטים ראשוניים באמצעות חרוזים אימונומגנטיים

קח תרחיף תאים עצביים, כולל אוליגודנדרוציטים לא בשלים ותאי עצב ראשוניים, מגור עכבר.

השעו מחדש את התאים במאגר מיון תאים מגנטיים כדי למנוע היווצרות תאים.

הוסף מיקרו-חרוזים מגנטיים מהונדסים הנושאים נוגדנים נגד O4 על פני השטח שלהם. מערבבים את התמיסה כדי להבטיח ערבוב אחיד.

דגירה כדי לאפשר למיקרו-חרוזים להיקשר עם גלקטוליפיד סולפט, אנטיגן O4 על אוליגודנדרוציטים, בעוד שתאים אחרים נשארים לא קשורים או קשורים באופן רופף.

שטפו את התערובת עם מאגר מיון תאים נוסף.

צנטריפוגה והשליכו את הסופרנטנט, ואז השעו מחדש את התאים.

לאחר מכן, העבירו את התאים הקשורים בחרוזים לעמודת הפרדה מגנטית המצוידת בפילטר שמסיר את גושי התאים הגדולים יותר.

במהלך הריצה, תחת שדה מגנטי, הקומפלקסים הקשורים בחרוזים נעים לעבר המגנט, ונצמדים לצדדים.

שטפו כדי להסיר תאים לא קשורים וקשורים באופן רופף.

אחזר את העמודה מהמפריד ושטוף אותה עם מדיום התפשטות כדי לאסוף את האוליגודנדרוציטים העיקריים ליישומים עתידיים.

לאחר הספירה, צנטריפוגה שוב את התאים, והשעיה מחדש של הגלולה ב-90 מיקרוליטר של מאגר מיון תאים מגנטי טרי לכל 1 x 10⁷ תאים. לאחר מכן, הוסף 10 מיקרוליטר של חרוזים נגד O4 לכל 1 x 10⁷ תאים, וערבב את תמיסת התא בתנועה עדינה. לאחר 15 דקות בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס, בתנועה עדינה, כל 5 דקות, הוסיפו בעדינות 2 מיליליטר של מאגר מיון תאים מגנטי לכל 1 x 10⁷ תאים לשטיפה על ידי צנטריפוגה, והשליכו את הסופרנטנט על ידי שאיבת ואקום זהירה.

השעו מחדש את הגלולה ב-500 מיקרוליטר של מאגר מיון תאים מגנטיים טריים עבור כל 1 x 10⁷ תאים והנח עמודת מיון חרוזים מגנטית בגודל מתאים לתוך המפריד המגנטי המתאים לו. הנח מסננת 40 מיקרון על העמוד ושטוף מראש את המסננת עם 3 מיליליטר של מאגר מיון תאים מגנטי, ואפשר למאגר לעבור דרך העמוד מבלי לתת לעמודה להתייבש. הוסף את התאים למסננת, ואחריה שטיפה של 1 מיליליטר עם מאגר מיון תאים מגנטי.

שטפו את העמוד שלוש פעמים עם 3 מיליליטר של מאגר מיון תאים מגנטי בכל שטיפה, ופעם אחת עם מדיום התפשטות אוליגודנדרוציטים. לאחר מכן, העבירו את העמוד לצינור של 15 מיליליטר והשתמשו בבוכנה כדי לשטוף מיד 5 מיליליטר של מדיום התפשטות אוליגודנדרוציטים טריים דרך העמודה.