אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 3:06 דק׳ • July 8th, 2025
קח תרחיף תאים עצביים, כולל אוליגודנדרוציטים לא בשלים ותאי עצב ראשוניים, מגור עכבר.
השעו מחדש את התאים במאגר מיון תאים מגנטיים כדי למנוע היווצרות תאים.
הוסף מיקרו-חרוזים מגנטיים מהונדסים הנושאים נוגדנים נגד O4 על פני השטח שלהם. מערבבים את התמיסה כדי להבטיח ערבוב אחיד.
דגירה כדי לאפשר למיקרו-חרוזים להיקשר עם גלקטוליפיד סולפט, אנטיגן O4 על אוליגודנדרוציטים, בעוד שתאים אחרים נשארים לא קשורים או קשורים באופן רופף.
שטפו את התערובת עם מאגר מיון תאים נוסף.
צנטריפוגה והשליכו את הסופרנטנט, ואז השעו מחדש את התאים.
לאחר מכן, העבירו את התאים הקשורים בחרוזים לעמודת הפרדה מגנטית המצוידת בפילטר שמסיר את גושי התאים הגדולים יותר.
במהלך הריצה, תחת שדה מגנטי, הקומפלקסים הקשורים בחרוזים נעים לעבר המגנט, ונצמדים לצדדים.
שטפו כדי להסיר תאים לא קשורים וקשורים באופן רופף.
אחזר את העמודה מהמפריד ושטוף אותה עם מדיום התפשטות כדי לאסוף את האוליגודנדרוציטים העיקריים ליישומים עתידיים.
לאחר הספירה, צנטריפוגה שוב את התאים, והשעיה מחדש של הגלולה ב-90 מיקרוליטר של מאגר מיון תאים מגנטי טרי לכל 1 x 107 תאים. לאחר מכן, הוסף 10 מיקרוליטר של חרוזים נגד O4 לכל 1 x 107 תאים, וערבב את תמיסת התא בתנועה עדינה. לאחר 15 דקות בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס, בתנועה עדינה, כל 5 דקות, הוסיפו בעדינות 2 מיליליטר של מאגר מיון תאים מגנטי
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים