אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 3:45 דק׳ • July 8th, 2025
קח שורש עצב וקוצץ אותו לחתיכות קטנות.
מעבירים לצינור המכיל אנזימי עיכול ודוגרים.
האנזים מעכל את המטריצה החוץ-תאית.
יש להוסיף חומר המכיל סרום כדי לעצור את העיכול.
פיפט את התוכן שוב ושוב, ואז צנטריפוגה והשליך את הסופרנטנט.
השעו מחדש את הגלולה.
העבירו את המתלה דרך מסננת כדי להסיר רקמה לא מעוכלת. דגרו את התאים שנאספו בצלחת.
תאי פיברובלסטים ושוואן או SCs מתחברים לצלחת ומתחלקים.
הסר את התאים הלא מחוברים. שוטפים את התאים המחוברים בעזרת מאגר פוספט.
הוסף אנזימי עיכול כדי לשחרר את ה-SCs הרגישים לעיכול. הפסק את העיכול עם מדיה.
נתק לחלוטין SCs על-ידי הוספת מדיה.
העבירו את התאים לצינור ולצנטריפוגה. השליכו את הסופרנטנט והשעו מחדש את התאים במדיה ספציפית ל-SC.
מעבירים את התאים לצלחת לא מצופה ודוגרים.
כל הפיברובלסטים שנותרו יידבקו, וישאירו SCs בתלייה.
העבירו את המתלה לצלחת מצופה מטריצה.
דגירה לחיבור וחלוקה של תאי שוואן.
פורסים את העצבים לחתיכות של 3 עד 5 מילימטר בעזרת מספריים. הוסף 1 מיליליטר של 0.25% טריפסין, והעביר את חלקי העצב לצינורות צנטריפוגה של 5 מיליליטר. דגירה בחום של 37 מעלות צלזיוס למשך 18 עד 20 דקות. לאחר מכן, כדי לעצור את העיכול, הוסף 3 עד 4 מיליליטר של DMEM המכיל 10% סרום בקר עוברי. פיפטו את התערובת למעלה ולמטה בעדינות, בערך 10 פעמים. צנטריפוגה בחום של 800 פעמים גרם למשך 5 דקות.
לאחר
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים