הכנת צינורות אנדותל מוחיים מעורקים פרנכימליים של עכבר

אבטח מוח עכבר, עם הצד הגחוני כלפי מעלה, בצלחת מצופה פולימר סיליקון המכילה בופר.

נתח קטע רקמה מחצי הכדור סביב עורק המוח האמצעי, או MCA, כאשר קטע הרקמה העליון משתרע מעבר לנקודת ההסתעפות ממעגל וויליס.

אבטח את הרקמה כשה-MCA פונה כלפי מעלה.

הסר את ה-pia mater, עם העורקים, המסתעפים מה-MCA.

אבטח את ה-pia mater עם העורקים. נתח את העורק והסר את הרקמה שמסביב. השלך את כל הענפים הדיסטליים.

דגרו את העורק בקוקטייל אנזים פרוטאוליטי כדי להקל על עיכול חלקי של הקטע.

החלף את האנזימים במאגר והעביר את המקטע המעוכל לתא המכיל חיץ על במת מיקרוסקופ המצוידת בפיפטה טריטורציה.

פיפט את העורק שוב ושוב כדי להסיר את האדוונטיציה המשוחררת, ותאי שריר חלקים, וכתוצאה מכך צינור שלם המכיל תאי אנדותל עורקיים.

הנח את צד המוח הגחוני כלפי מעלה בתא המכיל תמיסת דיסקציה קרה כדי לבודד עורקים פרנכימליים. כדי לבודד עורקים פרנכימליים, אבטח את המוח המבודד עם סיכות פלדה ותמיסת חיתוך קר בצלחת פטרי המכילה ציפוי פולימרי סיליקון בעומק של יותר מ-50 סנטימטרים.

חותכים מלבן של רקמת מוח משתי ההמיספרות עם מספריים חדים ומיושרים סביב ה-MCA, תוך הקפדה על כך שהחלק העליון של קטע הרקמה נמצא מעבר לנקודת ההסתעפות ממעגל וויליס. אבטח את רקמת המוח לתוך הצלחת כשה-MCA פונה כלפי מעלה בעזרת סיכות פלדה. מבצעים בזהירות חתך רדוד ליד הסיכות, ומסירים את הפיה בעז