התמיינות תאי גזע עובריים של עכברים לאוכלוסיית נוירונים מרושתת

תאי גזע עובריים של עכברי זרעים בצלחת בעלת התקשרות נמוכה המכילה אמצעי התמיינות.

דגירה תחת סיבוב כדי להקל על צבירה והתמיינות תאית לשושלת עצבית.

העבירו את האגרגטים לצינור ואפשרו להם להתיישב על ידי כוח הכבידה. השלך את המדיה.

השעו מחדש והעבירו את האגרגטים לכלי המקורי המכיל אמצעי התמיינות בתוספת חומצה רטינואית.

חומצה רטינואית גורמת לביטוי גנים עצביים, ומפעילה התמיינות לתאי אב עצביים.

העבירו את האגרגטים לצינור. הסר את המדיה והוסף טריפסין כדי לנתק את האגרגטים.

הוסף מעכב לנטרול הטריפסין.

פיפטה שוב ושוב כדי להשיג תרחיף תאים הומוגני. סנן את המתלה כדי להסיר אגרגטים.

צנטריפוגה והסר את הסופרנטנט. השעו מחדש את התאים במדיה.

זרעו את התאים על צלחת מצופה פולימר כדי להקל על הידבקות התאים.

הסר את המדיה. הוסף מדיה חדשה המכילה גורמי גדילה כדי לקדם התבגרות עצבית וליצור אוכלוסיית נוירונים מרושתת.

התמיינות של תאי גזע גזעיים לנוירונים מתחילה במהלך מעבר תאים שגרתי. נתק את ה-ESCs כמו קודם, אך כלול צלחת נוספת להתמיינות עצבית. העבירו 350 מיקרוליטר של תרחיף התא לתוך צלחת הצמדה נמוכה של 10 ס"מ המכילה 25 מיליליטר של מדיום התמיינות.

מניחים את המנה על שייקר אורביטלי המוגדר ל-30 עד 45 סל"ד בתוך אינקובטור תרבית רקמות ב-37 מעלות צלזיוס ו-5% פחמן דו חמצני, ודוגרים למשך 48 שעות. לאחר 48 שעות, השתמש בפיפטה של 25 מיליליטר כ