אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 5:29 דק׳ • July 8th, 2025
קצרו חוטי שדרה של עכברים וחתכו אותם לשברים.
העבירו את השברים לצינור המכיל אנזים פרוטאוליטי ו-DNase. מערבולת ודגירה.
האנזים מעכל את המטריצה החוץ-תאית של הרקמה, בעוד ש-DNase מפרק את ה-DNA החופשי המזהם.
מערבולת שוב ופיפטה שוב ושוב כדי להשלים דיסוציאציה של רקמות, לקבלת תרחיף חד-תאי.
צנטריפוגה והסר את הסופרנטנט. השעו מחדש את התאים בתמיסה המכילה DNase, ומעכב פרוטאז ומערבולת. המעכב מנטרל את האנזים.
שכבו תמיסת מעכב טרייה בחלק העליון, צנטריפוגה, והסירו את הסופרנטנט.
השעו מחדש את התאים באמצעי שיפוע צפיפות, מערבולת ואז צנטריפוגה.
התאים מתיישבים בתחתית, בעוד שפסולת המיאלין נשארת בחלק העליון.
השליכו את הפסולת. שטפו שוב ושוב עם חיץ, צנטריפוגה והסירו את הסופרנטנט. השעו מחדש את התאים באמצעי גדילה.
צלחת את התאים. המשטח הלא מצופה מקל על חיבור תאי גליה.
הסר את המדיה המבוזבזת והוסף מדיה טרייה כדי לגרום לשגשוג תאי גליה, תוך יצירת תרבית גליה מעורבת.
עובדים במכסה מנוע של תרבית רקמות, מעבירים ארבעה חוטי שדרה של עכברים לצלחת פטרי של HBSS. השתמש במספריים ובמלקחיים סטריליים כדי לחתוך כל אחד מחוטי השדרה לחתיכות קטנות. לאחר מכן, העבירו את החלקים לצינור חרוטי של 50 מיליליטר המכיל תערובת אנזים פפאין DNase. הימנע מהעברת HBSS לתערובת האנזימים מכיוון שהדבר עלול לגרום לירידה בביצועי האנזים.
חיוני שחלקי הרקמה יתעכלו
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים