בידוד תאי גנגליון רשתית מורין באמצעות מיון תאים המופעלים על ידי פלואורסצנטיות

הניחו רשתית עכברים על מסננת תאים לחה והשרו בתנועה מעגלית כדי להפריד את תאי הרשתית מהמטריצה החוץ-תאית.

מעבירים את המסננת לצינור איסוף.

הוסף מאגר פוספט ותמיסת סרום למסננת כדי לשטוף ולאסוף את התאים.

צנטריפוגה ליישוב התאים. השליכו את הסופרנטנט והשעו מחדש את התאים במאגר פוספט ובתמיסת סרום.

הוסף נוגדנים חוסמים הנקשרים לקולטני Fc על התאים, ומונעים קשירה לא ספציפית של נוגדני מטרה.

לאחר מכן, הוסף נוגדנים ראשוניים מתויגים פלואורסצנטיים ולא מתויגים הנקשרים לסמנים ספציפיים על פני התא בסוגי תאים שונים.

יש לשטוף כדי להסיר נוגדנים לא קשורים.

הוסף נוגדן משני מתויג פלואורסצנטי כדי להיקשר לנוגדנים הראשוניים הלא מתויגים.

יש לשטוף כדי להסיר נוגדנים לא קשורים.

בצע מיון תאים המופעל על ידי פלואורסצנטיות, או FACS כדי ללכוד את האותות הפלואורסצנטיים המובהקים של התאים המסומנים ולמיין את תאי הגנגליון ברשתית מאוכלוסיות שונות של תאי רשתית.

יש להניח עד 12 רשתית על מסננת ניילון סטרילית של 70 מיקרון שהורטבה ב-PBS ו-FBS, ולהשרות בעדינות את הרשתית עם הקצה האחורי של בוכנת מזרק של 10 מיליליטר בתנועה סיבובית. כאשר כל התאים מנותקים, הנח את המסננת מעל צינור איסוף פוליפרופילן, והשתמש בפיפטה P1000 כדי לסנן את התאים דרך המסננת לתוך צינור האיסוף.

שוטפים את המסננת עם PBS ו- FBS, מאגדים את הכביסה בצינור האיסוף. הוסף מספיק PBS