בידוד וטיפוח תאי עצב עובריים של אפרוחים במערך מרובה אלקטרודות

קח ביצת עוף מופרית המכילה עובר בשלב מוקדם.

עקרו את הקליפה ופתחו אותה בזהירות.

הסר את העובר. מנתחים ומעבירים את הראש לצלחת תרבות המכילה חיץ. הסר את גלגל העין.

בצע חתך והסר את שכבות העור, וחשוף את המוח הקדמי והמוח האמצעי.

הסר את השכבה הקרומית הפנימית וכלי הדם. לנתח ולהעביר את המוח הקדמי לצלחת תרבית עם מאגר.

חותכים את הרקמה לשברים קטנים יותר ומעבירים אותם לצינור חרוטי. לאחר שהשברים מתייצבים, הסר את המאגר.

הוסף תמיסת אנזים פרוטאוליטית. דגירה כדי לעכל את המטריצה החוץ-תאית של הרקמה ולשחרר נוירונים.

הסר מדיה עשירה באנזימים, שטוף במדיה נוירובזאלית, והסר את כל האנזימים שנותרו.

הוסף מדיה נוירו-בזאלית. נתק מכנית את הרקמה כדי להשיג תרחיף עצבי.

זרעו את הנוירונים הללו על מערכת מערך מרובת אלקטרודות המצופה במטריצה חוץ-תאית. הוסף מדיה נוירו-בזאלית ודגירה.

נוירונים מתחברים ומרחיבים הקרנות, ויוצרים רשת עצבית.

ביום ציפוי הנוירונים, הוציאו בקבוקון של מטריצה חוץ-תאית מהמקפיא של -20 מעלות צלזיוס. מרססים עם 70% אתנול ומניחים על קרח. הקפד להפשיר את המטריצה החוץ-תאית על קרח. אין להפשיר בטמפרטורת החדר, מכיוון שה-ECM מתפלמר מעל 0 מעלות צלזיוס.

עבוד במכסה המנוע BSL-2 כדי לדלל את המטריצה החוץ-תאית ל-25% על ידי הוספת 300 מיקרוליטר של מדיום נוירו-בסיסי קר ל-100 מיקרוליטר. לאחר מכן, השתמש בפיפטה P200 כדי להוסיף 10