בידוד וגידול תאים מעובר עכבר טלנספלונים דורסולטרליים

קחו עובר עכבר במאגר והפרידו את הגולגולת כדי לבודד את המוח.

הסר את קרומי המוח, השכבה הקרומית המכסה את המוח.

נתח את המוח כדי להפריד בין ההמיספרות.

בודד את הטלנצפלונים האחוריים מההמיספרות והעבר אותם לצינור.

הטלנצפלונים הדורסולטרליים עשירים בתאי עצב ותאי אב עצביים.

צנטריפוגה והסר את הסופרנטנט.

הוסף תמיסת אנזים. האנזימים מפרקים את מטריצת הרקמות ומשחררים את התאים.

הכניסו מדיום התפשטות המכיל סרום. חלבוני הסרום מעכבים את פעילות האנזים.

השתמש בפיפטה כדי לנתק את הרקמה באופן מכני וליצור תרחיף תאים.

צנטריפוגה והסר את הסופרנטנט המכיל אנזימים מומתים ופסולת רקמות.

השעו מחדש את התאים במדיום ההתפשטות.

העבירו את התאים למיקרו-צלחת מצופה מצע תרבית תאים.

דגירה כדי שהתאים ידבקו למצע. המדיום מקל על התפשטות תאי אב.

התחל בהסרת המוחות מ-5 עד 10 עוברי E14 בצלחת פטרי עם מדיום דיסקציה קרה. השתמש במלקחיים כדי לשלוף בזהירות את העור והגולגולת, ולבודד את המוח. תוך כדי עבודה תחת הסטריאומיקרוסקופ, השתמש במלקחיים לדיסקציה כדי להסיר את קרומי המוח. לאחר מכן, פצלו את הטלנצפלון באמצע כדי להפריד בין ההמיספרות.

כדי לבודד את הטלנצפלון הגבי הצדדי שנחתך לאורך העקומה הגבית והגבול הפליאלי-תת-פליאלי. העבירו את הטלנצפלון האחורי לצינור של 2 מיליליטר עם מדיום דיסקציה על הקרח עד שכל המוחות מנותחים. לאחר מיקרו-דיסקציה של הטלנצפלון הא