יצירת תצורת תא שלם באמצעות שיטת Patch Clamp
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 3:12 דק׳ • July 8th, 2025
התחל עם פרוסת מוח עכבר משותקת המונחת בתא הקלטה של מערך האלקטרופיזיולוגיה המלא בנוזל מוחי מלאכותי כדי לשמור על כדאיות עצבית.
ההתקנה מכילה מיקרופיפטת הקלטה מלאה בתמיסה קטיונית שהורכבה מראש המחוברת למגבר ויחידת בקרת לחץ.
תחת מיקרוסקופ, אתר תא עצב ומקם את המיקרופיפטה לידו.
הפעל לחץ אוויר חיובי כדי לנקות כל פסולת.
הזיזו את המיקרופיפטה לכיוון הנוירון עד שנוצרת גומה על הממברנה, המעידה על קרבה עצבית.
הפעל יניקה חלשה כדי למשוך טלאי ממברנה קטן בתוך המיקרופיפטה.
זה יוצר איטום הדוק המגביר את התנגדות המיקרופיפטה, ומאשר איטום יציב.
לשמור על פוטנציאל התא בפוטנציאל מנוחה פיזיולוגי ליציבות התא.
לאחר מכן, הפעל יניקה קצרה וחזקה כדי לשבש את קרום התיקון, וליצור קשר ישיר עם פנים התא.
תצורת תא שלם זו מוכנה לרישום פעילות חשמלית עצבית.
בעזרת גלגל המיקוד העדין של המיקרוסקופ, התחל להתמקד כלפי מטה תוך הורדת המיקרופיפטה בהדרגה. התמקד תמיד תחילה כלפי מטה, ולאחר מכן, הורד את המיקרופיפטה למישור המיקוד כדי להבטיח שקצה המיקרופיפטה לא יחדור בפתאומיות לתוך הפרוסה. כאשר המיקרופיפטה באה במגע עם פני השטח של הפרוסה, האטו את מהירות המיקרומניפולטור למצב בינוני-נמוך. הפעל בעדינות לחץ חיובי קל כדי לנקות כל פסולת על השביל.
לאחר מכן, התקרב לתא, או לסירוגין עם כפתורי הבקרה X, Y, Z, או על ידי התקרבות אלכסונית שבה שני צירי ה-XZ מ
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים