JoVE Encyclopedia of Experiments
מדעי המוח
0 צפיות • 2:05 דק' • July 8th, 2025
התחל עם תרבית משותפת של נוירונים-אסטרוציטים במערך מיקרו-אלקטרודות מרובה בארות או MEA.
כל באר מכילה רשת של נוירונים שמקורם בתאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם, או hiPSCs. אסטרוציטים של חולדות מספקים תמיכה לתחזוקת הרשת.
בסיס הבארות מכיל רשת של אלקטרודות זעירות.
מקם את ה-MEA במכשיר הקלטה כדי ללכוד את הפעילות האלקטרופיזיולוגית הספונטנית של הרשת העצבית.
הזרימו תערובת גז לחה לתוך התרבית כדי למנוע אידוי מדיה ולייצב את ה-pH, מה שמבטיח את כדאיות התא.
נוירונים מעבירים אותות באמצעות דחפים חשמליים, הידועים כפוטנציאל פעולה, הנעים לאורך האקסונים שלהם.
עם הגעתו לסינפסה, הדחף מפעיל שחרור של נוירוטרנסמיטורים, המפיצים את האות לנוירון הבא.
האלקטרודות בתוך כל באר רושמות בו זמנית פוטנציאל פעולה שנוצר על ידי מספר נוירונים המחוברים סינפטית.
הפעילות האלקטרופיזיולוגית הספונטנית של הרשת העצבית מאשרת את ההתמיינות של hiPSCs לנוירונים.
רכוש את הנתונים בהגברה פי 1,200 ודגימת האות ב-10 קילו-הרץ באמצעות כרטיס רכישת הנתונים MCS. רשום 20 דקות של פעילות אלקטרופיזיולוגית של נוירונים שמקורם ב-hiPSC שגודלו ב-MEAs. במהלך ההקלטה, שמור על הטמפרטורה על 37 מעלות צלזיוס ומנע אידוי בינוני ושינויי pH על ידי אספקת זרימה איטית קבועה של גז לח ל-MEAs. לאחר מכן, נתח את הנתונים באמצעות חבילת תוכנה מותאמת אישית.