אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 3:45 דק׳ • July 8th, 2025
קחו פרוסת גזע מוח של עכבר המכילה את גרעין שיווי המשקל המדיאלי, או MVN.
אבטח את הפרוסה בתא הקלטה מלא בנוזל מוחי מלאכותי כדי לשמור על כדאיות עצבית.
דמיינו את הפרוסה תחת מיקרוסקופ כדי לאתר נוירונים של MVN.
הפעל לחץ חיובי כדי לקדם מיקרופיפטה מלאה בתמיסה תוך-תאית המחקה סביבה דרך הרקמה.
כאשר הפיפטה נוגעת בנוירון, הממברנה העצבית תתעמעם.
הפעל לחץ שלילי כדי לשאוב חלק קרום קטן, וליצור אטימה הדוקה.
לאחר מכן, הפעל פעימות לחץ שליליות כדי לקרוע את הממברנה, וליצור חיבור רציף בין הנוירון לפיפטה.
החל אמפליטודות רעש אקראיות על הנוירון וזהה משרעת תת-סף שמעבר לה הרעש גורם לירי עצבי.
לבסוף, החל מגוון של גירויים חשמליים על הנוירון בשילוב עם משרעת הרעש האקראית תת-סף.
למדוד רווח עצבי - יכולתו של הנוירון לווסת את תגובת הירי שלו לגירויים בנוכחות רעש.
עבור אלקטרופיזיולוגיה של מהדק תיקון תא שלם, ראשית, משוך מיקרופיפטות עם התנגדות סופית שנעה בין 3 ל -5 מגה-אוהם כאשר הם מלאים בתמיסה פנימית על בסיס אשלגן, והניחו באמבטיה. כדי להשיג הקלטות מהדק טלאי של תא שלם מנוירונים בודדים ב-MVN, העבירו פרוסת רקמה בודדת מתא הדגירה לתא ההקלטה של מערך אלקטרופיזיולוגי סטנדרטי, והשתמשו בחוט ניילון על משקולת בצורת U כדי לאבטח את הפרוסה.
החדרה רציפה של תא ההקלטה עם aCSF קרבוגן ב-25 מעלות צלזיוס בקצב זרימה של שלושה מיליליטר לדקה, ומלא
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים