שימוש במערכים מרובי אלקטרודות למדידת פיזיולוגיה סינפטית בספירות קוקולטורה תלת-ממדית

קחו מערך מרובה אלקטרודות סטרילי או MEA, מכשיר המתעד את הפעילות החשמלית של תאי המטרה.

הוסף תמיסת פולימר ל- MEA ודגירה.

הפולימר מצפה את פני השטח של ה-MEA, ובכך מגדיל את תכונת משיכת המים של פני השטח.

הסר את עודפי הפולימר ושטוף במים נטולי יונים.

הוסיפו מטריצה חוץ-תאית, או ECM, ודגרו כדי לאפשר לה לצפות את ה-MEA. הסר את ה-ECM העודף.

לאחר מכן, הוסף את ספירות הקוקולטורה התלת-ממדיות הכוללות נוירונים ואסטרוציטים במדיה מתאימה.

דגירה כדי לאפשר לכדורים להיצמד לפני השטח של ה-MEA.

הנח את ה-MEA על ראש מבוקר טמפרטורהtagה של מערכת MEA ורשום את הפעילות החשמלית הספונטנית על פני האלקטרודות.

הפעילות החשמלית הנמדדת תואמת את התקשורת בצמתים העצביים בתוך הכדור.

התחל בציפוי פני השטח של כל מערך רב-אלקטרודות או MEA במילימטר אחד של פולי-אורניתין כדי להפוך את פני השטח להידרופילים ולדגור ב-37 מעלות צלזיוס למשך ארבע שעות לפחות. לאחר הדגירה, הסר את הפולי-אורניתין ושטוף את פני השטח של כל MEA במים נטולי יונים. לאחר מכן, הוסף 1 מיליליטר של מטריצה חוץ-תאית וחזור לחממה למשך ארבע שעות לפחות.

כשהוא מוכן, הסר את המטריצה החוץ-תאית, ולאחר מכן החל את הכדורים ב-1.5 מיליליטר של מדיום על פני השטח של MEA, וודא שהכדורים ממוקמים על גבי מערך האלקטרודות. מניחים להיצמד למשך יומיים. כדי למדוד את הפעילות החשמלית של כדורים עצביים, מקם את ה-MEA על במת ראש מבוקרת טמפרטורה.