חקר ההתרגשות של תאי עצב פלואורסצנטיים באמצעות מהדק טלאי של תא שלם

0 צפיות3:06 דק' • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

קח פרוסת עטרה של עכבר משותק בתא הקלטה עם aCSF.

הפרוסה מכילה אוכלוסיית נוירונים פירמידלית דלילה המבטאת אנזים מטרה וחלבון פלואורסצנטי.

הרכיבו פיפטת הקלטה הכוללת תמיסה תוך-תאית ואלקטרודה המחוברת למגבר למדידת אותות עצביים.

לזהות מיקרוסקופית את אזור רקמת המטרה ולאתר נוירון פלואורסצנטי.

הפעל לחץ חיובי על הפיפטה כדי למנוע סתימה ולקדם אותה לנוירון המטרה.

הלחץ החיובי גורם לשקע קל על הממברנה העצבית במגע.

שחרר את הלחץ ויוצר אטימה הדוקה בין הממברנה לקצה.

הגדר את פוטנציאל ההחזקה בערך שלילי קבוע כדי לייצב את הנוירון.

הפעל לחץ שלילי קצר כדי לקרוע את הממברנה, לחבר את הציטופלזמה לפנים הפיפטה וליצור תצורת תא שלם.

עבור למצב מהדק זרם והפעל פולסים חיוביים של זרם, ויוצר פוטנציאל פעולה המעיד על ריגוש עצבי.

העבירו פרוסה לתא ההקלטה בעזרת פיפטה של פסטר או מברשת קטנה. החזק את הפרוסה עם נבל, והחדיר אותה עם ACSF בקצב של 2 מיליליטר לדקה. כדי לתקן נוירון חיובי ל-GFP, אתר את אזור העניין דרך המיקרוסקופ ב-10x. לאחר מכן, מצא תא חיובי ל-GFP באמצעות המטרה 60x.

לאחר מכן, מלאו את אלקטרודת ההקלטה בתמיסה תוך תאית. לאחר מכן, הניחו פיפטה מזכוכית במחזיק הפיפטה. לאחר מכן, הניחו את קצה הפיפטה באמבטיה והתמקדו בקצה. לאחר שהפיפטה נמצאת באמבטיה, הפעל לחץ חיובי דרך מערכת בקרת הלחץ האחורי.

התקרב לתא המעניין תחת הנחיה חזותית תוך שמירה על לחץ אחורי בפיפטה. עם הופעת גומה קטנה על פני התא, שחרר את הלחץ. בשלב זה עלול להיווצר איטום הדוק עם התנגדות גדולה מ-1 ג'יגה-אוהם. אחרת, הפעל לחץ שלילי קל כדי להקל עליו.

בזמן יצירת החותם, הביאו את מהדק מתח האחיזה ל-60 מילי-וולט שלילי. לאחר שנוצר אטם הג'יגה-אום, הפעל דופק יניקה כדי לקרוע את קרום התא ולפרוץ למצב התא כולו. ברגע שהוא נמצא במצב תא שלם, עבור ממצב מהדק מתח למצב מהדק זרם והתחל להקליט.

07:23

הקלטות תיקון מהדק כל תא פרוסות המוח

סרטונים קשורים

0 צפיות

08:39

תא שלם תיקון מהדק הקלטות עבור קביעת electrophysiological של יון סלקטיביות ב Channelrhodopsins

סרטונים קשורים

0 צפיות

10:52

הערכה של ריבוי סינפטית באמצעות תאים כל תיקון-קלאמפ אלקטרופיזיולוגיה

סרטונים קשורים

0 צפיות

03:42

אלקטרופיזיולוגיה של מהדק טלאי תאי שלם: שיטה לחקר תכונות חשמליות של נוירונים

סרטונים קשורים

0 צפיות

03:12

יצירת תצורת תא שלם באמצעות שיטת Patch Clamp

סרטונים קשורים

0 צפיות

03:05

פוטו-טימולציה והקלטות מהדק טלאי של תא שלם של תאי עצב בפרוסות היפוקמפוס עכבר

סרטונים קשורים

0 צפיות

03:45

רישום מהדק טלאי של תא שלם בנוירון ג'לטינוזה מהותי של פרוסת חוט השדרה

סרטונים קשורים

0 צפיות

08:58

הצמד תיקון נייד לכל חוקר את המנגנונים של גירוי עצבי אינפרא אדום

סרטונים קשורים

0 צפיות

11:34

זיהוי אוכלוסיות נוירונים חושיים ספציפיים לחקר תעלות יונים מבוטאות

סרטונים קשורים

0 צפיות

08:44

צמד תיקון הקלטה של ​​תאי הקרנות amacrine בתוך הכנת שטוח הר Deafferentated רשתית העכבר

סרטונים קשורים

0 צפיות

עודכן לאחרונה: 1 אוגוסט 2026