אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 3:41 דק׳ • July 8th, 2025
אבטח פרוסת מוח עטרה של עכבר בתא הקלטה מלא ב-aCSF.
הכנס אלקטרודה מגרה דו קוטבית לשכבה הרדיאוטום של אזור CA3 בהיפוקמפוס. נוירוני CA3 מקרינים את האקסונים שלהם, המכונים בטחונות שאפר, ל-CA1.
מקם אלקטרודה סלקטיבית של יוני אשלגן בשכבה הרדיאטומית CA1.
מגרה חשמלית נוירונים CA3 לפתיחת תעלות נתרן מגודרות מתח. זרם יוני הנתרן הופך את פוטנציאל הממברנה לחיובי, המכונה דה-פולריזציה, ומייצר פוטנציאל פעולה.
לאחר שיא הדפולריזציה, תעלות נתרן מושבתות, ותעלות אשלגן מגודרות מתח מאפשרות יציאת יוני אשלגן, ומקטבות מחדש את הממברנה. לאחר מכן, פוטנציאל הממברנה משוחזר, ופוטנציאל הפעולה מתפשט ל-CA1.
האלקטרודה הסלקטיבית של יוני האשלגן מודדת את הזרימה, המוצגת על ידי עקומת תגובה.
הוסף חוסם כדי לעכב פעילות תעלת נתרן מגודרת מתח. עם גירוי חשמלי, היעדר תגובת יוני אשלגן מאשר שהדינמיקה שלו נובעת מפוטנציאל פעולה בביטחונות של שפר.
כדי למדוד את הדינמיקה של יוני האשלגן, הניחו בעדינות את פרוסת המוח באמבטיה באמצעות פיפטת פסטר והחזיקו אותה בעדינות במקומה עם נבל פלטינה עם מיתרי ניילון. ודא שקצות האלקטרודה המגרה הדו-קוטבית מקבילים זה לזה בקירוב, והם ישרים עם מישור הפרוסה. במהלך 5 עד 7 שניות, הכנס לאט את האלקטרודות לשכבה CA3 רדיאטום בעומק של כ-40 עד 50 מיקרומטר כדי לעורר את הבטחונות של שפר.
לאחר מכן, הכנס בזהירות את האלקטרודה הסלקט
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים