ניתוח שחרור ופינוי גלוטמט בסינפסה של נוירון יחיד בפרוסת מוח של עכבר

התחל עם מערך אלקטרופיזיולוגיה המכיל פרוסת מוח קדמית של עכבר שקועה ב-aCSF מחומצן.

aCSF מכיל חוסם תעלות יונים המעכב באופן סלקטיבי את תעלות הנתרן-יון, ומונע עירור עצבי המושרה על ידי נתרן.

הנוירונים בקליפת המוח מבטאים חלבוני חיישן לזיהוי גלוטמט פלואורסצנטי.

אתר בוטון אקסונלי יחיד של נוירון פרה-סינפטי המסוגל לשחרר גלוטמט, נוירוטרנסמיטר מעורר, בסינפסה, צומת שבו הוא מתחבר לנוירונים פוסט-סינפטיים.

מקם אלקטרודת גירוי ליד הבוטון הזה והפעל זרמי דה-פולריזציה.

זה מעורר את הנוירון הפרה-סינפטי, גורם לזרם יוני סידן ומקל על שחרור גלוטמט.

התחל להקליט את עוצמת הקרינה סביב הבוטון שנבחר.

הגלוטמט המשוחרר מקיים אינטראקציה עם חלבוני החיישנים והקולטנים על נוירונים פוסט-סינפטיים.

בינתיים, האירו את האזור הנבחר באור לייזר, מה שגורם לחלבוני החיישן הקשורים לגלוטמט להאיר; עוצמת הקרינה הגוברת מצביעה על שחרור גלוטמט.

עם הזמן, גלוטמט מתנתק מחלבוני החיישן ונכנס לאסטרוציטים, מה שגורם לירידה בעוצמת הקרינה, מה שמעיד על פינוי גלוטמט.

כדי לדמיין שחרור ופינוי גלוטמט באמצעות כונני XY של המיקרוסקופ, הנח את הזרוע החיובית לחיישן הגלוטמט שנבדק קרוב למרכז שדה התצוגה. לאחר עצירת הרכישה, לחץ על התמונה עם כפתור העכבר השמאלי כדי לקבוע את מיקום ה-XY של מרכז הבוטון במנוחה. קואורדינטות ה-XY של הסמן שנקבע יוצגו.

באמצעות נתוני הכיול, חש