אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 4:42 דק׳ • July 8th, 2025
נתחיל עם חולדה מורדמת מאובטחת במסגרת סטריאוטקטית עם גולגולת חשופה.
השתמש בנקודות ייחוס על הגולגולת כדי לכייל ולסמן את הקואורדינטות הרצויות.
קדחו חורים במקומות המסומנים.
הסר פסולת וחתך את השכבה החיצונית של המוח.
שטפו לעתים קרובות את החורים במי מלח כדי למנוע התייבשות.
קדחו חורים נוספים וברגי עיגון כדי לתמוך באלקטרודות.
התקן את אלקטרודות הייחוס ואלקטרודות ההקלטה האלקטרופיזיולוגיות. אבטח אותם על ידי מריחת שרף אקרילי.
סדרו אלקטרודות מיקרו-חוטי טונגסטן על מסגרת בהתאם למיקומים מרובי המטרות במוח.
אלקטרודות מרובות מאפשרות הקלטה בו זמנית של פעילויות מוח ממספר אתרי מטרה.
באמצעות נקודת הייחוס על הגולגולת, מקם את אלקטרודות המיקרו-חוט טונגסטן.
הכניסו אותם בעדינות למוח.
הגדר את תוכנת ההקלטה לזיהוי פעילות מוחית.
הורד את האלקטרודות לעומק היעד והתחל בהקלטת נתונים.
מתחת למיקרוסקופ, השתמש בכלי יישור חולדה סטריאוטקסי סטנדרטי כדי לכייל את הקצה המיועד לברגמה ולהתאים את מוט החותך עד שהנקודות המיועדות לברגמה ולמבדה על הכלי נוגעות בגולגולת בו זמנית. בעזרת מחזיק סטריאוטקסי עם צינורית, כייל אותו לברגמה ואז חשב את המיקום של כל חורי הקידוח בגולגולת.
לאחר מכן, סמן את מיקומי החורים שיש לקדוח על ידי גירוד זהיר של הגולגולת או באמצעות טוש צבע כירורגי. לאחר מכן, בעזרת מקדחה מיקרו, קדחו בזהירות את כל החורים בקוטר של כמילימטר. עבור STN ו- SNr, קדחו חור משותף בגודל של כ -2 מילימטרים על 3 מילימטרים.
קח צינורית דקה אחת, וכופף את הקצה ליצירת שני ווים. לאחר מכן, השתמש בווים כדי להסיר כל פסולת מחורי הקידוח וחתוך בזהירות והסר את הדורה מאטר בחור STN/SNr המשותף. לאחר מכן, יש לשטוף את חורי הקידוח במי מלח פיזיולוגיים.
מרחו טיפת מלח פיזיולוגית כל 15 דקות על חורי הקידוח כדי למנוע מהמוח והדורה להתייבש. לאחר מכן קח מקדחה מיקרו ובורג מיקרו תואם מנירוסטה. קדחו חור והברגו מיקרו-בורג בין חורי הקידוח של האלקטרודות האפידורליות הייחוס מעל המוח הקטן.
לאחר מכן, הנח את קצות האלקטרודות בפינצטה עדינה והחלק אותם ישירות מתחת לעצם הגולגולת לתוך חורי הקידוח. תקן את כל האלקטרודות האפידורליות עם אקריליק דנטלי דו-רכיבי. הקפד לא לכסות את נקודת הברגמה ולא להשפיע על חור STN/SNr הנפוץ.
לאחר מכן, הכנס את המחזיק המוכן עם אלקטרודות המיקרו-חוט טונגסטן למסגרת הסטריאוטקסית. כייל את האלקטרודה הגחונית ביותר לברגמה, שנועדה למקד את ה-STN. התאימו את עצמכם למיקום המחושב מעל חור ה-STN/SNr המשותף, והורידו את האלקטרודות אל המוח.
ודאו שהאלקטרודות של המיקרו-חוטים של טונגסטן נכנסות למוח בצורה חלקה. בהליך זה, הגדר את תוכנת ההקלטה כגון מסנן פס פס, והגביר את אות הנתונים הגולמי. לאחר מכן, השתמש במסנן LFP מקוון ומסנן ספייק עם הגדרות מתאימות.
עבור כל המסננים, השתמש במסנן מסוג באטרוורת'. הגדר סף ספייק למיון ספייק מקוון. רוב תוכנות ההקלטה מאפשרות הגדרה של סף ספייק, שהוא ערך משרעת מעל הסף שאות מסומן כספייק על ידי התוכנה. לאחר מכן, הורד לאט לאט את אלקטרודות המיקרו-חוט טונגסטן למילימטר אחד מעל ה-STN והמתן עד שהאות יתייצב במידת הצורך.