הקלטה אופטית של פעילות עצבית בפרוסות מוח מוכתמות בצבע רגיש למתח

קחו פרוסת מוח של עכבר משותק המוכתמת בצבע רגיש למתח או VSD, מולקולות פלואורסצנטיות המשתלבות בקרום העצבי ומגיבות לשינויים פוטנציאליים בממברנה.

הנח את הפרוסה בתא הקלטה.

התקן את אלקטרודת ההארקה עבור כרך בסיסtagהתייחסות.

לאחר מכן, מקם את האלקטרודות המגרות וההקלטה על הפרוסה.

הפעל דופק חשמלי.

הדופק מגרה את הנוירונים, מפעיל פתיחת תעלת נתרן מגודרת מתח וזרם יוני נתרן, מה שמוביל לשינוי פוטנציאל הממברנה.

זה גורם לפוטנציאל פעולה, הנמדד על ידי אלקטרודת ההקלטה, ומשנה את התכונות הפלואורסצנטיות של ה-VSD.

חשוף את פרוסת המוח לאורך גל ספציפי כדי לעורר את ה-VSD ולעורר פליטת פלואורסצנטיות.

לאחר הגירוי, תעלות הנתרן נסגרות בעוד תעלות האשלגן המגודרות במתח נפתחות, מה שמקדם את פליטת יוני האשלגן.

זה משנה שוב את פוטנציאל הממברנה וכתוצאה מכך משנה את הקרינה של ה-VSD.

רשום את הקרינה בזמן אמת כדי לייצג חזותית את הפעילות העצבית.

כדי להתחיל בהליך זה, הפעל את המגבר, המחשב ומערכת המצלמה ופתח את התוכנה. יוצקים aCSF בצינור של 50 מיליליטר, ומבעבעים אותו בקרבוגן. השתמש במשאבה פריסטלטית כדי להפיץ את ה-aCSF, והתאם את קצב הזרימה לכמיליליטר אחד לדקה.

לאחר מכן, התאם את גובה פיפטת היניקה כך שמפלס הנוזל בתוך תא הניסוי יהיה תמיד קבוע. הנח את האלקטרודה הקרקעית בתא. לאחר מכן, מלאו את אלקטרודת הזכוכית בכמות קטנה של aCSF, והניחו אותה