רישום פעילות עצבית בעכברים הנעים בחופשיות באמצעות פוטומטריית סיבים

התחל עם עכבר הנע בחופשיות עם צינורית סיבים אופטיים מושתלת.

חבר קצה אחד של כבל תיקון סיב אופטי לצינורית ואת הקצה השני למקור אור עירור.

העכבר מבטא אינדיקטור סידן מקודד גנטית מתויג פלואורופור ירוק, או GECI, באזור ההיפותלמוס הצדדי, או נוירוני LHA.

הסיב האופטי המושתל יוצר קשר עם אזור הבנולה הרוחבית, או LHb, שבו מסתיימים אקסוני ה-LHA.

עורר את ה-GECI באורך גל העירור האופטימלי שלו ורשום את אות הבסיס.

כעת, החל נשיפות אוויר חוזרות ונשנות על העכבר כדי לעורר תגובת לחץ מרתיעה.

גירוי זה מפעיל פוטנציאל פעולה במסופי אקסון LHA, פותח תעלות סידן מגודרות מתח ומאפשר זרימת סידן.

יוני סידן תוך-תאיים נקשרים ל-GECI, וגורמים לשינוי קונפורמציה המגביר את פליטת הקרינה הירוקה.

דמיין את האות האופטי.

פלואורסצנטיות מוגברת בתגובה לנשיפות אוויר בעכבר מאשרת את תפקידו של מסלול LHA-LHb בהעברת אותות מרתיעים.

התחל בבדיקת הקצה הדיסטלי של סיבי חוט התיקון בעין, ועם מיקרוסקופ מיני סיבים. אם פני הסיבים נשרטים, יש ללטש מחדש את הסיבים באמצעות סרט ליטוש סיבים עם חצץ עדין. לאחר מכן, נקו את הקצוות הדיסטליים של חוט התיקון עם 70% אתנול ואפליקטור עם קצה כותנה. נקה את צינוריות הסיבים האופטיים באמצעות 70% אתנול ואפליקטור קצה כותנה.

חבר את קצה הטבעת של כבל התיקון לסיב המושתל באמצעות שרוול מפוצל קרמי המכוסה בצינור כיווץ שחור. במהלך החיבור, וודא שהשרוול הדוק. אפשרו לחיה להתאושש לכמה דקות, ואז התחילו להקליט את האות האופטי והריצו את הניסוי. בזמן ההקלטה, עקוב היטב אחר המעקב החי כדי להבטיח הקלטות איכותיות, וצפה בכל קפיצות באות המעיד על כך שהשרוול אינו הדוק מספיק.