אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 3:52 דק׳ • July 8th, 2025
הנח פרוסת מוח של עכבר בתא הקלטה מלא בתמיסת הקלטה מחומצנת.
הפרוסה מכילה את גרעין הגניקולט הצדדי הגבי או dLGN, העשיר בנוירוני ממסר. נוירונים אלה יוצרים סינפסות רטינוגנקולאטיות עם הקרנות של תאי גנגליון ברשתית וסינפסות קורטיקוגניקולטים עם הקרנות עצביות מקליפת הראייה.
מקם פיפטה מגרה על דרכי הראייה כדי לחקור סינפסות רטינוגניקולאט או על הגרעין תלמי רשתית כדי לחקור סינפסות קורטיקוגניקולאט.
מקם פיפטת הקלטה ליד הפרוסה. בעזרת מיקרוסקופ, אתר נוירון ממסר.
הפעל לחץ חיובי כדי למנוע סתימת פיפטה תוך כדי התקרבות לנוירון העצב.
עבור ללחץ שלילי, ויצר חותם עם קרום התא, ואז קרע אותו כדי ליצור המשכיות עם הציטופלזמה.
באמצעות הפיפטה המגרה, העבירו פולסים חשמליים הגורמים להקרנות לשחרר נוירוטרנסמיטורים מעוררים, הנקשרים לקולטנים סינפטיים של נוירונים ממסר, ומפעילים זרימת יונים הנמדדת על ידי פיפטת ההקלטה.
בהליך זה, משוך את פיפטות ההקלטה באמצעות נימי זכוכית בורוסיליקט ומושך נימה. לאחר מכן, משוך את הפיפטות המגרות באמצעות אותו פרוטוקול אך שבור מעט את הקצה לאחר המשיכה כדי להגדיל את הקוטר. לאחר מכן, מלאו את פיפטות ההקלטה בתמיסה תוך-תאית, וביוציטין ומלאו את הפיפטות המגרות בתמיסת הקלטה.
לאחר מכן, הנח את הפרוסות בתא ההקלטה, והחדיר אותן ברציפות בתמיסת הקלטה מחומצנת בטמפרטורת החדר. דמיין את הפרוסות במיקרוסקופ זקוף המצויד ב
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים