אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 3:45 דק׳ • July 8th, 2025
הנח פרוסת חוט שדרה של חולדה בתא הקלטה ואבטח אותה עם עוגן רקמות.
חלחלו את הפרוסה בנוזל מוחי מלאכותי.
תחת מיקרוסקופ, זהה את אזור החומר הג'לטינוזה השקוף או אזור SG ובחר נוירון SG בריא.
מקם פיפטת טלאי מלאה בתמיסה יונית ליד הנוירון.
הפעל לחץ חיובי עדין כדי להסיר כל פסולת מקצה הפיפטה.
הזיזו את הפיפטה לכיוון הנוירון.
לאחר מכן, שחררו את הלחץ החיובי ליצירת גומה על הממברנה העצבית, וצרו אטימה.
שנה את פוטנציאל ההחזקה כדי לקרב אותו לפוטנציאל הממברנה במנוחה, או RMP.
השתמש ביניקה קצרה כדי לקרוע את הממברנה, וליצור תצורה של תא שלם.
ב-RMP, החל פולסים חשמליים דה-פולריזציה.
פולסים אלה פותחים תעלות נתרן מגודרות מתח, ומאפשרות זרימה מהירה של יוני נתרן.
זרם יונים זה מפעיל פוטנציאל פעולה, וכתוצאה מכך ירי נוירונים.
רשום את דפוסי הירי של תאי העצב.
כדי לבצע הקלטות מהדק טלאי של תאים שלמים מנוירונים של חומר ג'לטינוזה או SG, השתמש בתמיסות תוך-תאיות מבוססות יון אשלגן להקלטה, תוך יישום תמיסה מבוססת קטיון צזיום רק לרישום זרמים פוסט-סינפטיים מעכבים.
העבר בעדינות את פרוסת חוט השדרה לתא ההקלטה, ולאחר מכן, ייצב אותה היטב עם חוט פלטינה בצורת U עם חוטי ניילון, ליציבות פרוסה אופטימלית. יש להחדיר את הפרוסה בהתמדה עם ACSF מבעבע בטמפרטורת החדר, ולהגדיר את קצב הזלוף בין 2 ל-4 מיליליטר לדקה כדי להשיג חמצון מספיק.
לאחר מכן, באמ
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים