אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 3:18 דק׳ • July 8th, 2025
התחל עם אפרכסת עכבר, או אוזן חיצונית, מנותחת עם העצבים המחוברים שלה חשופים.
הכנס את העצב המיועד להקלטה לאלקטרודת ההקלטה.
הסר את שכבת השומן ליד שולי האפרכסת כדי לחשוף את בסיס זקיק השיער, ולאחר מכן קפל את העור כדי לחשוף את השערות לגירוי.
מקם בדיקה לגירוי מכני כדי לגעת ולהסיט את השערות.
גירוי זה מפעיל קצות עצבים תחושתיים, פותח תעלות יונים מגודרות מכנית, מאפשר זרימת יונים חיובית ומייצר פוטנציאל פעולה.
פוטנציאל הפעולה מתפשט דרך הקצוות הללו אל העצב הנרשם. דמיין את האות.
לאחר מכן, הוסיפו צבע פלואורסצנטי והמשיכו בגירוי השיער.
הצבע נקשר לממברנות העצביות המגורות ומופנם באמצעות אנדוציטוזיס מבלי להשפיע על הפעילות העצבית.
לאחר הגירוי, יש לשטוף כדי להסיר צבע לא קשור.
הוסף חומר מבודד כדי להסיר את הצבע הלא מופנם הקשור לממברנה.
באמצעות מיקרוסקופיה פלואורסצנטית, דמיין את הצביעה בזקיקי השיער כדי לזהות קצות עצבים מגורים מכנית.
כדי לבצע הקלטות מבוקרות של פוטנציאל פעולה מעורר גירוי, השתמש בבדיקה מכנית של זכוכית מיקרואלקטרודה בורוסיליקט מלוטשת באש בגודל 10 סנטימטר המחוברת למפעיל פיזואלקטרי קרמי. מקם את הגשושית כך שהיא תנוע במקביל לקפל העור ונוגעת בשערות, לא בעור. הניחו אותו כחצי עד מילימטר מעל פני העור. לאחר מכן, אמת ידנית את הגירוי על ידי האזנה לפלט שמע כאשר הגשושית זזה.
כעת, הגדר את התוכנה כדי להניע גירוי מכני של אזור קטן של שערות. לדוגמה, תכנת גירויים של שלוש שניות בחמישה סינוסואידים של הרץ כל 10 שניות. זה דורש תזוזה של בדיקה בין 200 ל-2000 מיקרון. לאחר מכן, המשך באמצעות גירוי אוטומטי חוזר כדי לבדוק את עקביות התגובות המוקלטות בעצבים. תוצאות חוזרות אמורות להיות ניתנות להשגה.
כאשר התוצאות עקביות, הורד את קצב החזרה לכל 30 שניות. הוראות נוספות ניתנות בפרוטוקול הטקסט. כדי לחקור את המאפיינים של התעלות המכנו-חושיות ולתייג את המסופים המכנו-חושיים סביב זקיקי השיער, הוסף לתמיסה 10 מיקרו-מולרי FM143 והשאיר למשך 60 דקות, תוך המשך גירוי השערות עם הגשושית המתנודדת.
צבע זה חוסם תעלות מתמר מועמדות בנוירונים חושיים בתרבית ובתאי שיער שבלול. עם זאת, הוא אינו חוסם את הירי בזקיקי שיער בוגרים באתרם. תיוג הקצוות מראה שהצבע פועל כמסופים, הממשיכים להגיב לגירוי מכני במהלך החשיפה לצבע.