רישום חוץ-תאי של פעילות חשמלית במערכת העצבים המרכזית של דרוזופילה

הנח מערכת עצבים מרכזית, או CNS, של זחל דרוזופילה בתוך תא הקלטה מלא בתמיסת מלח.

מערכת העצבים המרכזית כוללת את גרעיני הגחון והעצבים ההיקפיים היורדים.

הנח אלקטרודת יניקה בקצה האחורי של מערכת העצבים המרכזית. חבר את החדר לחוט הארקה כדי להפחית את רעשי הרקע.

הפעל לחץ שלילי כדי למשוך עצב היקפי לתוך האלקטרודה וליזום רישום חוץ-תאי של פעילות העצבים.

עקוב אחר היצירה הספונטנית של פוטנציאל הפעולה על ידי נוירונים לאורך זמן, המכונה תדר הירי הבסיסי, ואפשר לו להתייצב.

הוסף ממס כבקרה. רשום את הפעילות כדי להבטיח שתדירות הירי תישאר עקבית עם קו הבסיס.

הציגו את חומר בדיקת המטרה המומס בממס ורשמו את תדירות הירי.

עלייה בתדירות מציגה את האפקט המעורר של הסוכן, ואילו ירידה בתדירות מעידה על אפקט מעכב.

כדי להתחיל, ראשית, משוך את אלקטרודת פיפטת הזכוכית מנימי זכוכית בורוסיליקט להתנגדות של 5 עד 15 מגה-אוהם. הכנס את מערכת העצבים המרכזית המועברת לתא שעווה המכיל 200 מיקרוליטר מי מלח. מהדקים סיכת חרקים לא מצופה עם קליפ תנין המולחם לחוט האדמה, והכנס את הסיכה למי המלח כדי להשלים את המעגל. בעזרת המיקרומניפולטורים, כוון את האלקטרודה לקצה הזנב של מערכת העצבים המרכזית העברתית.

בטל רעשי רקע על ידי התאמת רמת הסף בתוכנת ניתוח הרכישה לפני חיבור גזעי העצבים ההיקפיים. הפעל לחץ שלילי קל על המזרק כדי למשוך עצבים היקפיים לתוך אלקטרוד