טכניקת מהדק טלאי מונחה תמונה אוטומטית לחקר תאי עצב בפרוסות מוח
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 4:41 דק׳ • July 8th, 2025
התחילו עם פרוסת מוח משותקת בתא הקלטה.
באמצעות התוכנה הנשלטת על ידי המצלמה של מיקרוסקופ, התמקד באזור המטרה
הפעל את נורית העירור וצלם מספר תמונות בעומקים שונים.
התוכנה מזהה את הקואורדינטות של תאים המסומנים בפלואורסצנט.
כעת, מקם את פיפטת התיקון המלאה בתמיסה המכילה את אלקטרודת ההקלטה לתוך החדר.
השתמש בתוכנה מתאימה כדי לכייל את בקרות המיקום.
בהגדלה גבוהה, כייל מחדש את הפקדים כדי למקד במדויק את התא המסומן בפלואורסצנט.
בחר את הקואורדינטות של תא היעד.
התחל את ההורדה האוטומטית של פיפטת התיקון.
המחשב עוקב אחר ההתנגדות באמצעות האלקטרודה. הפעל לחץ שלילי, עלייה בהתנגדות עקב מגע הפיפטה עם קרום התא מעידה על היווצרות ג'יגה-סיל.
לאחר מכן, התוכנה מפחיתה עוד יותר את הלחץ לנקב את קרום התא ולקבל תצורת תיקון של תא שלם.
בשלב זה, הניחו פרוסת מוח אחת במרכז תא ההקלטה. ייצב את פרוסת המוח בעזרת פרוסה או נבל. כדי לזהות את התא הפלואורסצנטי, מצא את אזור העניין בהגדלה פי ארבע. לאחר מכן, הזז את שלב המיקרוסקופ על ידי הפעלת מצב "לחץ כדי לזוז", ולחץ על מרכז אזור העניין. לאחר מכן, עבור לעדשת ההגדלה הגבוהה והתאם את המיקוד על ידי הזזת המיקרוסקופ בציר z באמצעות RF על לוח המקשים.
התוכנה מכוונת את המיקרוסקופ במצלמה לצלם סדרה של תמונות בעומקים שונים. לאחר מכן, התמונות האלה עוברות עיבוד ראייה ממוחשבת כדי למצוא תאים עם תווית
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים