אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 3:20 דק׳ • July 8th, 2025
התחל עם מערך אלקטרופיזיולוגיה המכיל מקטע מעי גס של עכבר משותק בתמיסת אלקטרוליטים מאוזנת.
למעי הגס יש גנגליון אגן גדול חשוף עם ענף עצב תחושתי של המעי הגס שנותח מראש המעביר אותות מהמעי הגס למוח.
המעי הגס מכוסה בשני קצותיו עם שסתומים תלת-כיווניים לעירוי מי מלח.
מלא את אלקטרודת ההקלטה ומקם אותה ליד העצב הנכנס.
הפעל יניקה עדינה כדי למשוך את העצב לתוך האלקטרודה, וליצור אטימה הדוקה.
עקוב אחר האות החשמלי העצבי הבסיסי והלחץ הפנימי של המעי הגס.
סגור את הברז על צינורית היציאה תוך החדרה רציפה של מי המלח למעי הגס.
זה גורם לעלייה הדרגתית בלחץ בתוך המעי הגס, וכתוצאה מכך להתנפחות המעי הגס ולגירוי העצב הנכנס.
הקליטו מחדש את האות העצבי ואת לחץ המעי הגס.
עלייה הדרגתית באות העצבי עם לחץ מוגבר מאשרת את הגירוי העצבי הנכנס.
בדוק פיפטת זכוכית שנמשכה מראש מתחת למיקרוסקופ הניתוח. שוברים את קצה האלקטרודה בעזרת זוג מלקחיים, כך שיהיה בגודל התואם את קוטר העצב שיש לרשום. לאחר מכן, שפעו את הקצה על ידי הנחתו קרוב להתלקחות קלה יותר.
אנשים חדשים במתודולוגיה זו עשויים גם להתקשות בשיפוע קצה האלקטרודה התואם לגודל העצב.
לאחר מכן, הנח את האלקטרודה המשופעת במחזיק האלקטרודה. לאחר מכן, חבר מזרק של 10 מיליליטר ליציאת הצד של המחזיק להפעלת לחץ שלילי או חיובי על האלקטרודה. לאחר מכן, חבר את המחזיק לשלב הראש של המגבר הביולוגי, והרכיב את שלב הראש על מניפולטור.
לאחר מכן, העבירו את האלקטרודה לאמבט הרקמות, ומלאו את האלקטרודה בתמיסת קרבס על ידי הפעלת יניקה עדינה, עד שהיא נוגעת בחוט הכסף של המחזיק. לאחר מכן, הניחו את קצה האלקטרודה קרוב לקצה החתוך של העצב, והפעילו לחץ שלילי כדי לשאוב את העצב לתוך האלקטרודה. לאחר מכן, הפעל לחץ שלילי נוסף כך שכמילימטר אחד מהעצב נמשך לתוך האלקטרודה, ויוצר אטימה הדוקה.
כעת, הפעל את המגבר הביולוגי והגדר את המסנן ל-300 עד 3,000 הרץ. עקוב אחר האות באוסילוסקופ, והקלט את אות העצב ואת אות הלחץ התוך-לומינלי בתוכנת עיבוד הנתונים Spike. לאחר מכן, החל את נפיחות הרמפה של המעי הגס על ידי סגירת הברז התלת-כיווני על צינורית היציאה תוך עירוי רציף. עקוב אחר הלחץ התוך-לומינלי עד שהוא מגיע ל-60 מילימטר כספית.