אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 7:22 דק׳ • July 8th, 2025
קח מקטעים של עורק מוח אחורי של עכבר.
דגירה עם תמיסת אנזים כדי לפרק את מטריצת הרקמות, ולשחרר את התאים.
החלף את התמיסה במאגר ולאחר מכן העבר קטע לתא הקלטה.
נתק מכנית את רקמת החיבור ושכבות תאי השריר החלק, ובודד את צינור האנדותל הבסיסי.
אבטח את הצינור, הסר את השכבות המנותקות והוסף חיץ פיזיולוגי.
הנח את החדר בתוך מערכת הקלטה עם זרימת חיץ רציפה.
הכנס מחוון סידן פלואורסצנטי שנכנס לתאי האנדותל, ואז הכנס אלקטרודת הקלטה לתא.
מתן תרופה המעוררת זרם יוני סידן וגורמת לאיתות במורד הזרם לשחרור סידן מהרטיקולום האנדופלזמי.
המחוון נקשר לסידן ועם עירור פולט פלואורסצנטיות.
עלייה בסידן מפעילה תעלות אשלגן תלויות סידן, גורמת ליציאת אשלגן ומשנה את פוטנציאל הממברנה.
רשום בו זמנית שינויים בסידן התוך תאי באמצעות האות הפלואורסצנטי ופוטנציאל הממברנה באמצעות האלקטרודה.
בהליך זה, הכינו את מנגנון הטריטורציה באמצעות מיקרוסקופ, מצלמה ובמת אלומיניום המחזיקה תא ומיקרומניפולטורים. אבטח מיקרו-מזרק עם בקר משאבה הסמוך לבמה ולדגימה. לאחר מכן, מלאו לחלוטין פיפטת טריטורציה בשמן מינרלי, ואבטחו אותה מעל בוכנת המיקרו-מזרק.
לאחר מכן, באמצעות המיקרו-מזרק עם בקר המשאבה, משוך כ-130 ננוליטר של תמיסת דיסוציאציה לתוך הפיפטה תוך הקפדה על היעדר בועות אוויר. לאחר מכן, הנח מקטעי עורקים שלמים לתוך מיליליטר אחד של תמיסת דיסוציאציה עם ריכוזים
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים