חקירת פוטנציאל לוואי ממושך של דה-פולריזציה (PDA) בפוטורצפטורים של דרוזופילה
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 3:06 דק׳ • July 8th, 2025
אבטח זבוב דרוזופילה לבן עיניים למחזיק בזירת הקלטות.
מקם מקור אור ליד הזבוב.
השתל את האלקטרודה הקרקעית בגב הזבוב.
הכנס את אלקטרודת ההקלטה לפריפריה החיצונית של עין הזבוב, ליד תאי קולטני האור ברשתית המכילים פוטופיגמנט.
התאימו את הזבוב לזמן קצר. זה ממיר מטרודופסין, הצורה המופעלת באור של הפוטופיגמנט, לרודופסין, צורתו הלא פעילה.
החל פולס אור כתום בעוצמה גבוהה. זה ממיר את כל המטרודופסין שנותר לרודופסין.
לאחר מכן, החל פולסים של אור כחול. האור הכחול ממיר רודופסין למטרודופסין, יוזם מפל איתות ופותח תעלות יונים ספציפיות.
זה גורם לזרם יונים חיובי מתמשך ודפולריזציה מתמשכת, גם לאחר הסרת האור הכחול - פוטנציאל הלוואי הממושך של הדפולריזציה, או PDA, שנרשם על ידי האלקטרודה.
כעת, החל מחדש את פעימות האור הכתום כדי להמיר את המטרודופסין לרודופסין.
זה עוצר את מפל האיתות, מסיים את ה-PDA ומקטב מחדש את קרום קולטני האור.
הנח את מחזיק הזבוב בכלוב פאראדיי כהה על בלוק מגנט, וודא שהזבוב נמצא כחמישה מילימטרים מקצה מוביל האור. הנח את אלקטרודת ההקלטה מעל עין הזבוב, ואת האלקטרודה הקרקעית מעל הגב העליון של הזבוב באמצעות המיקרומניפולטורים. לאחר מכן, הכנס את האלקטרודה הקרקעית לחלק האחורי של הזבוב באמצעות המיקרומניפולטורים.
הכנס את אלקטרודת ההקלטה לפריפריה החיצונית של עין הזבוב, רצוי באמצעות המיקרומניפולטורים. סגרו את כלו
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים