הקלטת תגובות סינפטיות CA3-CA1 בפרוסה היפוקמפוסית של חולדה

הניחו פרוסת היפוקמפוס של חולדה במערך אלקטרופיזיולוגיה.

מקם את האלקטרודות המגרות בשכבת השכבה הרדיאטומית של אזור CA1 בהיפוקמפוס, המקבל הקרנות אקסונליות מנוירוני CA3.

הנח אלקטרודת הקלטה ליד הדנדריטים האפיקליים CA1.

מקם אלקטרודת הקלטה נוספת בשכבת הפירמידלה.

עם הגירוי, ההקרנות האקסונליות של CA3 מתפרקות ויוצרות פוטנציאל פעולה, ומשחררות נוירוטרנסמיטורים מעוררים.

נוירוטרנסמיטורים אלה נקשרים לדנדריטים אפיקליים CA1 פוסט-סינפטיים, וגורמים לזרם יונים חיובי ודפולריזציה של הממברנה, המכונה פוטנציאל פוסט-סינפטי מעורר, או EPSP.

מדידות אלקטרודות ההקלטה סיכמו EPSPs מהדנדריטים האפיקליים - השדה EPSP או fEPSP. לאחר קבלת אותות fEPSP יציבים, הורד את האלקטרודות והשהה לזמן קצר.

החל טווח של עוצמות גירוי כדי לקבוע את יחסי הקלט-פלט עם שיפוע fEPSP, ולאחר מכן בחר והחל עוצמה ספציפית בהתבסס על השיפוע.

אלקטרודת ההקלטה השנייה מודדת את פוטנציאל הפעולה המשולב מגופי תאים עצביים CA1, ויוצרת עליות באוכלוסייה.

בניסויי תיוג ולכידה סינפטיים, מתחת למיקרוסקופ, מקם את שתי האלקטרודות המגרות בשכבה הרדיאטומית של אזור CA1 כדי לעורר את סיבי הבטחון של שאפר ואלקטרודת הקלטה אחת באזור הדנדריטי האפיקלי של CA1 באמצע הדרך בין האלקטרודות המגרות כדי להקליט תגובות fEPSP.

הנח אלקטרודת הקלטה נוספת בשכבת הפירמידלה לרישום ספייק אוכלוסייה. כאשר כל האלקטרודות נוגעות בפרוסה, ספק גירוי בדיקה כדי להבטיח שניתן לקבל אות EPSP שדה תקין בשתי הכניסות.

לאחר קבלת אות fEPSP מתאים, בזהירות, הורד את האלקטרודות כ-200 מיקרון עוד יותר באמצעות כפתורי התנועה העדינים של המניפולטורים, ולאחר מכן, אפשר 20 דקות להתאוששות הנתח. לאחר מכן, קבע את יחס הקלט/פלט על ידי מדידת שיפוע השדה EPSP בטווח של עוצמות זרם מ-20 מיקרו-אמפר עד 100 מיקרו-אמפר.

לאחר מכן, עבור כל קלט, הגדר את עוצמת הגירוי המעוררת 40% משיפוע השדה המקסימלי EPSP כגירוי קבוע לאורך כל הניסוי. לאחר 15 עד 20 דקות, התחל לתעד את קו הבסיס.

רשום קו בסיס יציב של לפחות 30 עד 60 דקות לפני השראת LTP/LTD.