אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 3:18 דק׳ • July 8th, 2025
התחילו עם פרוסת מוח של חולדה שמכילה את אזור נוירוני המטרה שמחובר לאקסון רגיש לאור מאזור אחר במוח.
הנח את הפרוסה בתא ההקלטה השקוע ואבטח אותה עם עוגן פרוסה.
תחת מיקרוסקופ, אתר את השכבה הרצויה וזהה את נוירון הפירמידה המטרה.
הרם את מטרת המיקרוסקופ כדי ליצור מניסקוס עם משטח הפרוסה.
הורד מיקרופיפטה מזכוכית מלאה בתמיסת הקלטה תוך-תאית לתוך המניסקוס הזה.
גע בתא הפירמידלי המזוהה עם קצה הפיפטה כדי ליצור שקע בקרום.
מרחו יניקה ליצירת חותם.
הגדל את היניקה עד שהקרום נקרע, ויוצר תצורת תא שלם.
בעזרת מקור אור רכוב, החל פולסי אור על הפרוסה.
פולסי אור אלה מפעילים פוטנציאל פעולה באקסון הרגיש לאור, ומשחררים נוירוטרנסמיטורים בסדק הסינפטי.
רשום את תגובות הנוירונים הפירמידליים לשחרורים אלה כדי לנתח את היעילות הסינפטית.
לזיהוי תא יעד, מקמו את הפרוסה בתא ההקלטה ושיתקו אותה באמצעות עוגן פרוסה. בהגדלה נמוכה, באמצעות תאורת אינפרא אדום, נווט לשכבת LEC 5. לאחר מכן, שנה למטרת טבילה במים בהגדלה גבוהה, וזהה את הנוירונים הפירמידליים.
סמן את מיקום התא על הצג בעזרת סרט. לאחר מכן, כדי ליצור מהדק תיקון של תא שלם, לייצר מיקרו-פיפטה מזכוכית בורוסיליקט ולמלא אותו בתמיסת הקלטה תוך-תאית. הנח את המיקרופיפטה המלאה במחזיק האלקטרודה, והפעל לחץ חיובי על ידי נשיפה חזקה לתוך פיה המחוברת ליציאת הצד של מחזיק האלקטרודה.
הרם את מטרת המי
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים