העמסה ופריקה של צבע FM בתיווך מיקרואלקטרודה בתאי עצב של זחלי דרוזופילה

התחל עם זחלי דרוזופילה, עם סיבי שריר ועצב חשופים השקועים בתמיסה המכילה שלפוחיות של צבע ממברנה פלואורסצנטי, או צבע FM.

צבע ה- FM נקשר לשומנים בקרום התא ויוצר ציפוי פלואורסצנטי מעליו.

בעזרת יחידת מיקרומניפולטור, מקם את קצה המיקרואלקטרודת היניקה מתחת למיקרוסקופ.

התמקדו בסיבי העצב ובמיקרואלקטרודה.

השתמש בלחץ שלילי כדי למצוץ לולאה של סיבי העצב לתוך המיקרואלקטרודה.

הפעל פולסים זרם כדי לעורר את סיבי העצב.

זה מפעיל את הצומת העצבי-שרירי, שבו נוירון מוטורי מתחבר לסיב שריר, כדי ליזום אנדוציטוזיס שלפוחית סינפטית.

במהלך תהליך זה, התא בולע את הממברנה המצופה בצבע FM ליצירת שלפוחיות אנדוציטיות מוכתמות, אידיאליות להדמיית שלבים פרה-סינפטיים של הולכה עצבית.

שטפו את צבע ה-FM והחליפו את התמיסה החיצונית.

החל פולסים זרמים כדי לפרוק את השלפוחיות המוכתמות בצבע FM מהתא.

לגירוי חשמלי, הכינו פיפטת יניקה באמצעות מושך המיקרואלקטרודות כדי להשיג את גודל ההתחדדות והקצה הנדרשים. לאחר מכן, יש ללטש באש את קצה המיקרו-אלקטרודה עם מיקרו-זיוף כדי ליצור התאמה הדוקה בעת יניקת עצב מוטורי יחיד.

החלק את פיפטת היניקה על מחזיק האלקטרודה על מיקרומניפולטור, המחובר לצינור פלסטיק ארוך וגמיש ולמזרק. לאחר מכן, הניחו את התכשיר עם צבע FM על במת המיקרוסקופ והרימו את הבמה עד שהזחל ופיפטת היניקה יהיו במוקד.

לאחר מכן, שאבו לולאה של עצב מוט