ב Vivo הדמיית סידן באמצעות חיישני סידן סינפטיים מקומיים בדרוזופילה מלנוגסטר
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 3:39 דק׳ • July 8th, 2025
תקן זבוב שמוחו חשוף בתא הדמיה.
הזבוב מבטא אינדיקטור סידן מקודד גנטית, או GECI הממוקם בדנדריטים של גוף הפטרייה, או נוירונים MB.
חבר את הזבוב עם חוטי חשמל ומקם מחט העברת ריח ליד האנטנה שלו.
הוסיפו טיפת חיץ על המוח החשוף, מקמו את הזבוב מתחת למיקרוסקופ וחברו את המחט למערכת העברת ריחות.
לעורר את ה-GECI ולספק גירוי ריח.
הריח נקשר לקולטני הנוירונים החושיים של האנטנה, ויוצר פוטנציאל פעולה.
פוטנציאל הפעולה מתפשט מהנוירונים החושיים לנוירוני ההקרנה, גורם לשחרור נוירוטרנסמיטר ומקל על זרימת סידן ופלואורסצנטיות GECI בנוירוני MB הפוסט-סינפטיים.
חזור על הפעולה עם ריח שני ושלישי.
לאחר מכן, יש למרוח את הריח הראשון עם שוק חשמלי ואת השני בלי.
לבסוף, העבירו את שלושת הריחות ללא זעזועים. רשום את הקרינה.
פלואורסצנטיות מופחתת בתגובה לגירוי הקשור להלם בהשוואה לבקרות מגלה פלסטיות סינפטית הנגרמת על ידי למידה.
להדמיה של מחווני הסידן מבוססי GFP, כוון את הלייזר של מיקרוסקופ מולטיפוטון המצויד בלייזר אינפרא אדום, ומטרת טבילה במים המותקנת על שולחן מבודד רטט, לאורך גל עירור של 920 ננומטר, והתקן מסנן מעבר פס GFP. באמצעות כפתור הכוונון Z הגס, סרקו דרך ציר ה-Z של המוח כדי לאתר את אזור העניין במוח.
השתמש בפונקציה Crop כדי למקד את הסריקה רק באזור העניין כדי למזער את זמן הסריקה, וסובב את תצוגת הסריקה כך שהחלק הקדמי של הרא
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים