אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 3:54 דק׳ • July 8th, 2025
הנח כיסוי המכיל תאי כליה עובריים המבטאים תעלות יונים תלויות אור וחלבון מדווח פלואורסצנטי על תא מדידה המיושם בסיליקון. סגור אותו והוסף מאגר חיצוני.
מקם את החדר הזה מתחת למיקרוסקופ. הניחו אלקטרודת אמבטיה מלאה באגר. לחלחל עם מאגר להסרת שאריות מדיה ותאים מתים.
באמצעות מסנן פלואורסצנטי, זהה והתמקד בתא המטרה.
חבר פיפטת תיקון למיקרומניפולטור. הפעל לחץ כדי למנוע סתימה ולהתקרב לתא.
מקם את הפיפטה ליד התא ושחרר לחץ חיובי ליצירת טלאי ממברנה בקצה.
לאחר יצירת תיקון הממברנה, הפעל לחץ שלילי כדי לקרוע את הממברנה.
הפעילו אור באורך גל מסוים כדי לפתוח את תעלות היונים. תנועת היונים נרשמת כשינוי מתח על ידי האלקטרודה.
כדי להתחיל, אטום את תא המדידה בסיליקון כדי למנוע דליפה של המאגר החיצוני. לאחר מכן, הנח כיסוי אחד לתוך החדר וסגור אותו. מלאו את החדר בזהירות במאגר חוץ-תאי כדי למנוע את ניתוק התאים. לאחר מכן, הנח את תא המדידה מתחת למיקרוסקופ באמצעות המטרה 40x להדמיית תאים.
לאחר מכן, הניחו גשר אגר מעל אלקטרודת האמבטיה והניחו אותו בתא יחד עם חיישן מפלס הנוזל ויציאת הזלוף של מטפל האמבטיה. החלף את התמיסה החוץ-תאית פעמיים עם 1 מיליליטר של תמיסה חיצונית טרייה כדי להסיר את מדיום התרבית השיורי ואת התאים המנותקים. הביאו את התאים למיקוד וחפשו תא שעבר טרנספטציה, שצריך לבודד מתאים אחרים. לאחר מכן, השתמש בסט מסננים משולש
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים