אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 2:50 דק׳ • July 8th, 2025
מקם תרבית של גופי תאי עצב תחושתיים באוזן הפנימית בתא הקלטה.
מלאו חזית פיפטה מהדק תיקון בתמיסה פנימית.
מילוי חוזר באותה תמיסה המכילה אנטיביוטיקה מחוררת ממברנה, המאפשרת לה להגיע בהדרגה לקצה.
מלאו שני שליש מהפיפטה בתמיסת האנטיביוטיקה, הכניסו אותה למחזיק המכיל אלקטרודת הקלטה והורידו אותה לתא.
דמיינו תחת מיקרוסקופ כדי להתקרב לנוירון עצב.
כאשר קצה הפיפטה יוצר קשר עם הנוירון, פני השטח העצביים יוצרים גומה, וההתנגדות עולה.
הפעל לחץ שלילי ליצירת אטימה הדוקה בין הפיפטה לקרום.
שמור על פוטנציאל ההחזקה קרוב לפוטנציאל הממברנה במנוחה.
האנטיביוטיקה מחוררת את הממברנה, ומאפשרת תנועת יונים בין התא לאלקטרודה ליצור סביבה יונית יציבה.
החל שלבי מתח על תעלות יונים פתוחות מגודרות מתח, המאפשרות זרימת יונים ויצירת זרמים פרופורציונליים לפונקציית תעלת היונים, הנרשמים על ידי האלקטרודה.
טובלים את קצה הפיפטה בתמיסה הנקייה של צלחת התרבות, כדי למלא אותה בתמיסה נקייה שאינה מכילה אמפוטריצין. מלאו את החלק האחורי של הפיפטה בתמיסה הפנימית המכילה אמפוטריצין. טובלים את קצה הפיפטה בחזרה לתמיסה הנקייה של צלחת התרבית בזמן שהאמפוטריצין נכנס לאט לקצה מגב הפיפטה. לאחר מכן, סיים למלא את הפיפטה בתמיסת האמפוטריצין עד 2/3 מהפיפטה.
הורד את הפיפטה לאמבטיה של תא ההקלטה, ואתר את קצה הפיפטה באמצע שדה הראייה. ודא שהקצה נקי מבועות אוויר או
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים