רישום מהדק טלאי זוגי של הקשרים העצביים בפרוסות מוח חריפות

אבטח פרוסת מוח עם אזור המטרה בתא הקלטה.

מקם פיפטת הקלטה המכילה תמיסה פנימית מעל נוירון פוסט-סינפטי וקבל תצורה של תא שלם.

הציגו פיפטת טלאי חיפוש ליד נוירון פרה-סינפטי.

פיפטה זו ממולאת בתמיסה מבוססת נתרן למניעת דה-פולריזציה של תאי עצב בזמן חיפוש אחר התא הפרה-סינפטי.

השתמש ביניקה עדינה כדי ליצור תצורת איטום רופפת עם פיפטת החיפוש.

החזק את פוטנציאל הממברנה והפעל פולסים גדולים של זרם כדי להפעיל פוטנציאל פעולה בנוירון הפרה-סינפטי.

עקוב אחר התגובה הפוסט-סינפטית לגירוי זה.

אם לא מזוהה תגובה, יש לתקן נוירון פרה-סינפטי אחר ולחזור על הגירוי.

המשך בתהליך זה עד שנצפתה תגובה בנוירון הפוסט-סינפטי.

החלף את פיפטת החיפוש בפיפטה מקליטה וקבע תצורה של תא שלם בנוירון הפרה-סינפטי.

הפעל פולסים זרמים כדי לעורר פוטנציאל פעולה בנוירון הפרה-סינפטי ורשום את התגובה הפוסט-סינפטית.

לאחר הכנת פרוסות מאזור היעד, אפשרו להם לדגור. במהלך תקופה זו, משוך את פיפטות התיקון, שאמורות להיות בעלות שוק ארוך ודק. לאחר אבטחת פרוסת מוח עם נבל פלטינה בתא ניסוי, מלאו פיפטה הקלטה בתמיסה פנימית.

הנח את הפיפטה במגבר המקדים והדביק נוירון פוסט-סינפטי משוער במצב תא שלם. באמצעות פיפטת טלאי חיפוש בעלת התנגדות של 8 עד 10 מגה-אוהם מלאה בתמיסה פנימית שבה מלחי אשלגן מוחלפים במלחי נתרן, הפעל יניקה עדינה על פיפטת החיפוש כדי לתקן נוירון פרה-סינפטי פוטנציאלי בתצורה מחוברת לתאים רופפים.

החזק את פוטנציאל הממברנה מתחת לאטם הרופף בין שלילי 30 לשלילי 60 מילי-וולט במצב מהדק זרם. לאחר מכן, הפעל פולסי זרם גדולים של 0.2 עד 2 ננואמפר כדי לעורר פוטנציאל פעולה בתא הפרה-סינפטי הפוטנציאלי.

שימו לב לפוטנציאל הפעולה הזה כספייק קטן מואר על כרךtagתגובת המתח. הגדר את תדירות הגירוי ל-0.1 הרץ כדי למנוע התמוטטות של התגובה הפוסט-סינפטית. אם הנוירון הפוסט-סינפטי אינו מגיב לגירוי של הנוירון הקדם-סינפטי הפוטנציאלי שנבדק, טלאי נוירון פרה-סינפטי פוטנציאלי חדש במצב איטום רופף.

בדוק עד 30 נוירונים פרה-סינפטיים פוטנציאליים בדרך זו, והמשיך להשתמש באותה אלקטרודת תיקון חיפוש כל עוד ניתן ליצור אטם עם התנגדות של יותר מ-30 מגה-אוהם.

אם גירוי במצב איטום רופף מביא ל-EPSP או IPSP עם חביון של פחות מחמש אלפיות שנייה בנוירון הפוסט-סינפטי, הסר את פיפטת החיפוש מהנוירון הקדם-סינפטי.

באמצעות אלקטרודת תיקון הקלטה מלאה בביוציטין המכילה תמיסה פנימית רגילה עם התנגדות של ארבעה עד שמונה מגה-אוהם, טלאי את הנוירון הפרה-סינפטי והקלט במצב מהדק זרם של כל התא. עורר פוטנציאל פעולה על ידי הזרקת זרם בנוירונים הפרה-סינפטיים ורשום את התגובה הפוסט-סינפטית.